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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存,12个月有效。
- 库存:
现货
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
5ml
用途:常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样,在使用或加热时没有异味,使蛋白上样操作更加安全健康。
注意事项:主要由Tris-HCl(pH6.8), SDS, Bromophenol Blue, Glycerol,TCEP等组成。
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文献和实验电泳分析检测结果。这种方法得到的目的蛋白 N是在细胞内与蛋白 M 天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。 步骤 用预冷的 PBS 溶液洗涤贴壁细胞两次(对于悬浮细胞则用台式离心机以 800-1000 rpm 转速通过离心洗涤)。 加入预冷的 RIPA 液(含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂),RIPA 液的用量:按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。 注:悬浮细胞,收集
/ L EDTA 100 mmol / LNaCI (2)50 mmol / L 苯甲基磺酰氟(PMSF )。 (3)10 mg / ml 溶菌酶。 (4)脱氧胆酸。 (5)1 mg / ml DNase I。 2 )超声破碎法 (1 )TE 缓冲液。 (2 )2×SDS -PAGE 凝胶电泳加样缓冲液: 100 mmol / L Tris-HCI (pH 8 .0 ) 100 mmol / L DTT
,4 ℃ ;吸出上清,用100 μL 水重新悬浮沉淀;分别取10 μL上清和重新悬浮的沉淀,加10 μL 2× 凝胶电泳加样缓冲液,进行SDS-PAGE 。 3 )包涵体的溶解和复性 (1)试剂与配制 ① 缓冲液I: 1 mmol / L PMSF 8mol /L 尿素 10 mmol / L DTT 溶于前述裂解缓冲液中。 ② 缓冲液Ⅱ: 50 mmol / L KH2PO
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