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详询
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详询
- 英文名:
【干冰】ROX Dye qPCR Calibration Plate *Optimized for ABI7500 Fast 96-Well*
- 库存:
99
- 供应商:
北京孚博生物
- CAS号:
详询
- 规格:
1Plate
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文献和实验。G. 反应体系的设置:A-G这五个步骤简单设置好,可以保存,修改反应程序或者立刻进行反应。需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料,默认的是ROX。有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面;也有的是单独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择。BioTeke的MasterMix里没有参比染料,所以选择“none”。设置好之后,就可以把配置好的PCR管放进仪器,点击RUN!Real-time qPCR数据分析1. Real-time qPCR常见参数基线
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
。 3. 仪器设置 所有仪器的操作都基本一致。设置的时候包括反应板设置(plate setup)和程序设置(program setup)。我们以 ABI StepOne 为例,详细看一下反应设置: A. 首先是实验目的选择:定量还是其他。我们命名为「BioTeke」,进行「定量」实验。 B. 实验方法的选择:我们选用的比较 Ct 的 SYBR Green 方法, Fast 程序,以 cDNA 为模板进行。 C. 目的基因的设置:有几个目的基因和目的基因的名称。 D. 样品的设置:包括
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或者校正染料(reference dye,passive dye)常用的是ROXTM(现在已经是ABI的注册商标了!)或者其他染料,只要不影响检测PCR产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非PCR震荡,校正加样误差或者是孔与孔之间的误差,提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把ROXTM配制在MasterMix或者Premixture里。如果反应曲线良好或已经优化好反应体系,也可以不加ROXTM染料校正。 通常来讲,real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR
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