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iFluor® 780 maleimide
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99
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北京孚博生物
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1mg
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文献和实验【精华】vol 687 Chapter 4 巢式PCR侧翼序列测定实验
2.1. 3' RACE LaNe 1. 20 ng total RNA (see Note 1). 2. 10 mM dNTPs. 3. ThermoScript ® Reverse Transcriptase and accompanyingbuffers (Invitrogen) (see Note 2). 4. TTT3 primer: 5'-gene-specific sequence followed byTTTTTTTTTTTTTTTTV
一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
,UVitec)80W照射3min以固定DNA。 1.2.3 探针标记、杂交和检测 以OSsec27p作为探针,按照North2South® Biotin Random Prime DNA Labeling and Detection Kit(PIERCE)使用说明进行探针标记、杂交和信号检测。X光片曝光时间为30s。 2、结果 2.1 转基因烟草的PCR初步鉴定 转基因烟草的PCR扩增产物的琼脂糖凝胶电泳分析如图1所示。以转基因烟草基因组DNA为模板进行扩增均能得到预期1.8kb的条带(Lane
了很大成功。由于杂质、干扰分子在红外区几乎不发光,用红外荧光进行检测的背景非常低,灵敏度很高,可检测到低达15amoles的荧光分子。加上双通道检测(680nm激发,710nm检测;780nm激发,820nm检测),两个通道检测波长相距110nm,相对于通常的可见荧光四色检测来说,几乎没有光谱重叠的干扰(见下图),保证了TILLING分析中每一个突变碱基的准确识别及整个检测的灵敏度。 以下就具体给大家介绍双色红外荧光检测技术在反向遗传学中与TILLING法结合的应用,及基于双色红外
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