200ul透明吸头，斜嘴，未灭菌，袋装

最全面的MTT大汇总

）。4.培养时间。200ul的培养液对于10的4～5次方的增殖期细胞来说，很难维持68h，如果营养不够的话，细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止，影响结果，我们是在48h换液的。5.MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数。做MTT时，尽量无菌操作，因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。6.理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。7.实验时应设置调零孔，对照孔，加药孔。调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜，不同的是对照孔加溶解

MTT（四唑盐比色实验）大汇总

个比较大的范围先初筛。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记！否则，可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。 3. 时间点的设定。 在不同时间点的测定OD值，输入excel表，最后得到不同时间点的抑制率变化情况，画出变化的曲线，曲线什么时候变得平坦了（到了平台期）那个时间点应该就是最好的时间点（因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显）。 4. 培养时间。 200 ul的培养液对于10的4~5次方的增殖期细胞来说，很难维持68 h，如果营养不够的话，细胞会由增殖

四唑盐（MTT）比色法

保存在-20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分装在EP管里，用的时候现配，直接往培养板中加，没必要一下子配那么多,尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。 普通MTT法实验步骤： 1. 接种细胞：用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，以每孔1 000-10 000个细胞接种到96孔板，每孔体积200 ul。 2. 培养细胞：同一般培养条件，培养3-5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。