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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
广州华韵生物科技有限公司
- 规格:
20Assays
| 检测原理 | 细胞在发生凋亡时,会激活一些特异性的DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。使得凋亡细胞的DNA被切割成180~200bp片段,在琼脂糖凝胶上通常以180~200bp的阶梯状迁移。TdT酶(脱氧核糖核酸末端转移酶)将标记的dUTP连接到断裂DNA暴露的3'-OH末端,通过在这些末端添加荧光dUTP的方式来标记晚期凋亡细胞,从而可以通过流式细胞仪进行检测。 |
| 应用类型 | 细胞凋亡检测;TUNEL;DNA片段化 |
| 检测方法 | 荧光 |
| 样本类型 | 细胞 |
| 检测时间 | 2.5-3 小时 |
| 检测仪器 | 流式细胞仪 |
| 荧光 | PriFluor 555 |
| 激发/发射波长(EX/Em(nm)) | 555/565 |
| 自备试剂 | PBS(含1%BSA)缓冲液(PH7.2~7.4) |
| 运输条件 | 冰袋 |
| 保藏温度 | -5℃~-20℃,避光保存。 |
| 保质期 | 12个月 |
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文献和实验Detection of apoptotic process in situ using immunocytochemical and TUNEL assays
breaks in fine-needle aspiration biopsies by in situ end labeling of fragmented DNA. Cytometry 15: 169. 4. Li, X., Darzynkiewicz, Z. 1995. Labelling DNA strand breaks with BrdUTP. Detection of apoptosis and cell proliferation. Cell Prolif . 28: 571
with an expression vector encoding the gene of interest. Subsequently cells are stained with propidium iodide and, utilising flow cytometry, transfected, GFP-expressing single cells are detected and apoptotic cells in this population are identified by their DNA
,PBS洗2遍,上机分析。 1.2.5 流式细胞仪分析 光源为488 nm氩离子激光器,FITC受激发后发绿色荧光,PI发红色荧光,每份标本收集10 000个细胞,然后在Macintosh650计算机上用相关软件分析数据,用HP-Deskjet 1600CM打印机打印结果。 2 结果 2.1 PI检测法 在正常二倍体细胞DNA 峰(G1峰)前出现一亚二倍体凋亡峰,称Ap峰(图1)。 2.2 TUNEL检测法 根据FITC
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