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转染了microRNA-mock基因的阴性对照细胞Hela-

mock/LUC(带荧光素酶)价格
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  • ¥3000 - 5000
  • 雅吉生物
  • 上海
  • YS2319LUC
  • 2025年07月10日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 英文名

      Helamock/LUC

    • 库存

      10

    • 供应商

      上海雅吉

    • 品系

      细胞系

    • 组织来源

      ATCC来源

    • 物种来源

      人,大鼠,小鼠等物种

    • 免疫类型

      详见説明

    • 运输方式

      顺丰速运

    • 年限

      理论无限传代

    • 生长状态

      上皮

    • 规格

      1×10^6cells/T25培养瓶

    雅吉生物作为高科技生命科学和生物技术领域的领先企业,拥有建立完善的鉴定流程和种类齐全的细胞资源库。我们提供的细胞株经过严格的质量控制和鉴定,确保其在科研实验中的可靠性和稳定性。我们的细胞资源库广受国内重点实验室和科研人员的信赖和好评,是您发表高质量文章时的可靠选择。如有任何关于细胞储存或其他细胞技术的疑问,欢迎随时咨询我们。

    转染了microRNA-mock基因的阴性对照细胞Hela-mock/LUC(带荧光素酶)价格细胞复苏后应立即置于适当的培养基中,培养基需经过严格的无菌处理和配方优化,确保细胞的健康生长。
    建议同时购买完培,同时购买非常优惠
    培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的好办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。

    产品细节图片1
    转染了microRNA-mock基因的阴性对照细胞Hela-mock/LUC(带荧光素酶)价格细胞培养步骤
    a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养。
    贴壁细胞传代步骤如下:
    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
    2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。
    3.轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基重悬。
    4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,然后放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。
    转染了microRNA-mock基因的阴性对照细胞Hela-mock/LUC(带荧光素酶)价格悬浮细胞传代步骤日下:
    1、半换液法
    半换液处理,竖着培养瓶在培养箱静置1小时左右,轻轻吸掉3ml左右培养基,然后补给3ml的完全培养基,如果培养基变色慢,可直接加500ul左右FBS,传代的时候可以直接补给5ml培养基  分两个培养瓶培养,一般这样传代3次左右可以离心传代一次,去掉死细胞。
    2、离心换液法
    如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

    产品细节图片2
    b、细胞冻存:
    1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次; 
    2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min; 
    3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。 
    4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上再转入液氮罐中。
    C、细胞复苏:
    1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁; 
    2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min; 
    3、弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
    4、第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
    转染了microRNA-mock基因的阴性对照细胞Hela-mock/LUC(带荧光素酶)价格注意事项:有些细胞贴壁不牢,在运输过程中容易发生细胞脱落,这是正常现象。如脱离较多可将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000rpm离心5min,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入胰酶1-2ml,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5ml完全培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2ml完全培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶,后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。

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      -----------------------------------------------对,我是在表达高的细胞上再转的这个miRNA,有可能效果不明显,我现在在考虑换个细胞株试试,有结果就上来汇报一下. shilei5794749 这个问题我也很感兴趣,我们之前预测一个microRNA的靶基因,选microRNA低表达的细胞系用EGFP-N和dual-luc做。一个师姐是转染microRNA mimics后24小时靶基因mRNA和蛋白相对control升高,48小时mRNA和蛋白跟control一样;而另一个师姐做的结果是24小时mRNA和蛋白都降低

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