- ￥1280
- gemig
- XFM20109
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
5
- 规格：
96T
产品货号：XFM20109
产品规格：96T
储存条件：2-8℃
有效期：6个月
本产品仅供科研实验用，不做其他用途！
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免
反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验Cell Reports | 熊波课题组研发逆转老龄动物卵子质量新方法
一种有效的方法和策略来维持或恢复老龄化卵子的质量。虽然许多高龄妇女选择辅助生殖技术生产试管婴儿，但由于该技术并不能从根本上改善卵子质量，导致成功率也非常低。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）是糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化中诸多酶的辅助因子，参与细胞内众多生物学过程，特别是作为去乙酰化酶 Sirtuin 家族的限速共底物，NAD + 可以有效调节线粒体功能、代谢和衰老。据报道，NAD + 水平在许多组织中随着年龄的增长而下降，并与衰老有关的各种疾病相关，细胞内 NAD + 的减少改变了 NAD
，首先使用 Invent 柱式法胞质胞核分离试剂盒将样品分为胞浆蛋白和胞核蛋白，每组按照胞浆组分，胞核组分顺序分别上样，使用 GAPDH 作为胞浆内参，LaminA/C 作为胞核内参，验证胞质胞核分离成功无交叉污染。 检测目标蛋白 NF-ĸB p65，验证了过表达 circ-Sirt1 的血管平滑肌细胞（VSMCs）中，TNF-ɑ 诱导的 NF-ĸB p65 的核易位被显著抑制，并伴有促炎细胞因子和黏附分子表达减少（图 E）。相反，敲低内源性 circ-Sirt1 增强了 TNF-ɑ 诱导的 NF-ĸB
去乙酰化酶 (HDAC) 酶是共抑制因子，通过降低赖氨酸乙酰化水平和增加染色体凝聚而逆转乙酰化的作用。Sirtuins（沉默信息调节因子）是一组 NAD 依赖性去乙酰化酶，靶向组蛋白。顾名思义，它们通过低乙酰化组蛋白维持基因沉默，据报道有助于维持基因组稳定性。而乙酰化最早是在组蛋白中检测到的，胞浆蛋白也被报道是乙酰化的，因此乙酰化似乎在细胞生物学中发挥着比单纯的转录调控更大的作用。此外，乙酰化修饰和其他翻译后修饰，包括磷酸化、泛素化和甲基化之间的串扰，可以改变乙酰化蛋白的生物学功能。可通过使用乙酰赖氨酸特异性抗体
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