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48T
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文献和实验后通过加热可以是蛋白失活,从而不需纯化便可以进行连接反应。 4.XbaI是典型的dam甲基化敏感内切酶,您可以分析您的载体序列,看是否是甲基化敏感,如果是甲基化敏感,那么您的载体肯定切不开,可以有两种解决方案:A.用甲基化缺陷型菌株转化提取质粒之后再做酶切,NEB有免费赠送的甲基化缺陷型菌株;B.可以用phi29DNA聚合酶进行链置换反应,再进行酶切就可以切开了。 qingchagood wj1989113 wrote:
应用试剂是否能正常工作?4) PCR仪是否工作正常?5) PCR反应条件是否合适?如果一切正常,还无法解决问题时,我们可以免费重新合成引物。7.测定了引物的OD值后发现A260/A280由于核酸在260nm附近有强吸收,而蛋白质在280nm附近有强吸收,从生物体内提取核酸时,常用A260/A280比值来评价核酸纯度(比值在1.8~2.0之间),这一判断是基于序列中A、G、C、T所占比例大致相同时的结果。而合成的DNA /RNA 则不同,序列很短 (通常在20~30个碱基之间),其中A、G、C、T
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