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穹顶状培养,以促进类器官生长。 1.细胞制备 ①组织样本置于含高级DMEM/F12和普里莫星的50mL离心管中,4℃保存直至分离。为确保最佳效果,30mg组织需在24h内解离,以防止细胞死亡和冻融损伤。 ②为每份组织样本制备新鲜消化液:在15mL离心管中加入5mL高级DMEM/F12,再加入5mg/mLII型胶原酶和10μMY27632,混匀后4℃保存备用。 ③将组织转移至10cm培养皿中。用两把手术刀将组织切成约1mm³的小块,用移液管加入5mL消化液。 ④将培养皿中的内容物转移至15
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