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48T
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文献和实验【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
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干货 | CUT and Tag 让 ChIP-Seq更简单高效!
&Tag 技术的实验流程简单,可一步实现 DNA 的片段化和接头连接,仅需 9h 即可实现从细胞到二代测序文库的转化。 实验流程主要包括:①收集细胞;②分别孵育一抗和二抗;③孵育 pA/pG-Tn5 转座子(Hyperactive pA/pG-Tn5 Transposon);④激活转座子,进行 DNA 片段化;⑤DNA 提取;⑥文库扩增与纯化。 1. 细胞起始量低 投入不同起始量的 HEK293 细胞( 100 或 10,000 个细胞),按照 Vazyme #TD901
溶液,在沸水浴中加热3~4min,冷却后使用。(14)高分子质量标准蛋白溶液包括卵白蛋白(MW=450000)、牛血清白蛋白(662000)、磷酸化酶B (925000)、ß-半乳糖苷酶(1162500)、肌球蛋白重链(2000000) ,配制方法同(13)。 ( 15 ) 25%乙醇。 四、操作步骤 (1)在制板支架上置一专用有机玻璃槽,将固定好的玻璃板下部插入槽内,中部用两个文具夹固定在支架竖板上,在槽内倒入已充分溶化的琼脂,冷凝后封闭胶腔底部。 (2)取50ml烧杯1只,加30
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