SF-295人胶质母细胞瘤细胞

背景介绍

SF295胶质母细胞瘤细胞系来自一名67岁女性患者的颞叶肿瘤。源自颞叶肿瘤的患者来源的胶质母细胞瘤细胞系。SF295细胞不表达神经胶质标志物GFAP或谷氨酰胺合成酶，但已显示阳性表达神经纤维蛋白-1，该蛋白被鉴定为多形性胶质母细胞瘤中最常见的突变因子之一。SF295细胞在培养中表现出超三倍体和神经胶质样形态，并且在无胸腺小鼠中是非致瘤性的。SF295细胞系在胶质母细胞瘤的化疗治疗研究中被高度发表，代表了用于评估药物和分子调节剂对胶质母细胞瘤的作用的有价值的细胞模型。多形性胶质母细胞瘤是成人最常见和恶性的原发性脑肿瘤，复发率高，五年生存率低于5% 。近50%的胶质母细胞瘤起源于大脑的颞叶。胶质母细胞瘤是最具侵袭性的癌症形式，并表现出高度的化疗耐药是研究胶质母细胞瘤的有价值的模型。

SF-295人胶质母细胞瘤细胞产品基本信息

细胞名称：SF-295人胶质母细胞瘤细胞

种属来源：人

组织来源：颞叶肿瘤

细胞形态：成纤维细胞样

生长特性：贴壁生长

培养基：1640+10%FBS+1%P/S

生长条件：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃

传代方法：1:2至1:3，每周 3次

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

支原体检测：无

SF-295人胶质母细胞瘤细胞培养操作

SF-295人胶质母细胞瘤细胞复苏步骤

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL完全培养基，培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。

SF-295人胶质母细胞瘤细胞传代步骤

如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加入0.25%Trypsin-0.02% EDTA消化液于培养瓶中(T25瓶1-2ml，T75瓶2-3ml)，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1 -3min(难消化的细胞可以适当延长消化时间)，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加3-4ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含6-8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

SF-295人胶质母细胞瘤细胞冻存步骤

待SF-295细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

培养注意事项

1. 收到SF-295细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。.观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置2-4h。

4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

6.该SF-295人细胞仅供科研使用。

7. 说备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议1：2传代 。

8. 注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。