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- 逸漠/IMMOCELL
- 厦门
- IM-M241
- 2025年10月17日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
alpha TC1 clone 6
- 库存：
999
- 供应商：
厦门逸漠生物科技有限公司
- 肿瘤类型：
详询
- 细胞类型：
详询
- 品系：
详询
- 组织来源：
胰腺
- 相关疾病：
详询
- 物种来源：
小鼠
- 免疫类型：
详询
- 细胞形态：
上皮细胞
- 是否是肿瘤细胞：
详询
- 器官来源：
小鼠
- 运输方式：
常温T25瓶运输或冻存发货
- 年限：
长期
- 生长状态：
贴壁生长;松散连接的簇群和悬浮的单细胞
- 规格：
1x106cells/T25或1mL冻存管
背景介绍
alpha TC1 clone 6是1988年从患有腺瘤的小鼠胰腺中分离出来的α细胞系。它是从表达SV40大T抗原癌基因的转基因小鼠在大鼠胰高血糖素前原启动子控制下产生的腺瘤中克隆出来的。alpha TC1 clone 6是一株胰腺Alpha细胞株。 它从alpha TC1细胞株克隆而来，而alpha TC1细胞株是从转染了大鼠前高血糖素原启动子控制下的SV40大T抗原抗癌基因的转基因小鼠中产生的腺癌中得到的。 其亲本细胞株是低分化的，既产生高血糖素又产生胰岛素。 两个克隆细胞株，alpha TC1 clone 6和alpha TC1 clone 9 分化程度较高并且只产生高血糖素。 Alpha TC1 clone 6表现的分化程度最高，表达的高血糖素水平也最高。 .The alpha TC1 clone 6对研究胰岛的许多生物学特性包括高血糖素的生物合成及细胞分裂素类敏感性都很有用。
alpha TC1 clone 6小鼠胰腺细胞产品基本信息
细胞名称：alpha TC1 clone 6 小鼠胰腺细胞
种属来源：小鼠
组织来源：胰腺
细胞形态：上皮细胞
生长特性：贴壁生长;松散连接的簇群和悬浮的单细胞
培养基：MEM(含NEAA)+10%FBS+1%P/S
生长条件：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃
传代方法：1:2至1:3，每周 2-3次
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
支原体检测：无
注：该细胞为半贴壁细胞，有部分细胞会聚团飘起属于正常现象，处理时，将上清细胞一同收集处理即可。
alpha TC1 clone 6小鼠胰腺细胞培养操作
alpha TC1 clone 6小鼠胰腺细胞复苏步骤
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
alpha TC1 clone 6小鼠胰腺细胞传代步骤
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a、收集细胞培养上清：抽出瓶中的培养基和悬浮的细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清，细胞重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
b、剩下贴壁的细胞，用不含钙、镁离子的PBS轻轻润洗细胞1次。
c、加入0.25%Trypsin-0.02% EDTA消化液于培养瓶中(T25瓶1-2ml，T75瓶2-3ml)，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3 min(难消化的细胞可以适当延长消化时间)，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，加少量培养基终止消化。
d、按3mL/瓶补加培养基，轻轻打匀吹下细胞后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
e、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养中。(第一次传代建议一个满的T25传一个10cm或者2个T25)。
alpha TC1 clone 6小鼠胰腺细胞冻存步骤
待alpha TC1 clone 6细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心5 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，加 1 mL血清重悬细胞，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
培养注意事项
1. 收到alpha TC1 clone 6细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
6. 该alpha TC1 clone 6细胞仅供科研使用。
7. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1：2传代 。
8.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。
悬浮细胞收货注意事项：
1、收货时需镜下拍照(看密度、状态)
2、静置后需镜下拍照(看整体密度)
a.如密度50%以下，建议换液并竖瓶培养
b.如密度50%-80%，建议换液培养，隔天观察密度
c.如密度90%，建议传代
3、换液及传代处理前，培养瓶竖着放置至少半小时(使细胞沉到瓶底);收集上清，必须将瓶内所有培养基(70ml)全部收集!并用PBS(10ml)润洗瓶底并收集!离心转速为1000rpm，5min。
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文献和实验) precursor-like protein 2/ NM_001642 transgelin 2/NM_003564 integral membrane protein 2A/NM_004867 interferon-stimulated transcription factor 3, gamma 48kDa/NM_006084 interferon, alpha-inducible protein (clone IFI-6-16)/NM_022873
的比较。反应：抗GAPDH单抗（clone 6C5）能够与鱼、蛙、鸡、兔、小鼠、大鼠及人组织来源的GAPDH反应，但不能与酵母GAPDH反应。一般我们选择内参与要检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上。actin即肌动蛋白，是细胞的一种重要骨架蛋白。actin大致可分为六种，其中四种是不同肌肉组织特异性的，这些不同的亚型组织分布是不一样的，在肌肉组织中的beta-actin分布就很少，心肌主要是alpha-cardiac muscle actin。因此不同的组织本来就应该选择不同的内参，不能一概
，就是直接标记一抗，再用底物显色。这种方法叫直接法，与用二抗的间接法相比有诸多不足，标记二抗可用于很多种不同特异性的一抗，避免了标记很多一抗的需要，同时因为一抗结合不止一个二抗分子，所以二抗可以增强信号。所以一般情况下都釆用间接法进行检测。 Western bloting要注意的一些问题 1、为了让实验更加严谨有说服力都要设计对照实验，对照分为：阳性对照（最好有标准品（比如β-actin，GAPDH）或阳性血清）；阴性对照（测血时用相应小鼠未免疫血清（即正常血）；空白对照（不加一抗，用PBS代替
