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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
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96T
产品货号:XFP41948
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验一、实验原理 将抗C5a单克隆抗体包被固相聚苯乙烯板,加入经聚乙二醇(PEG)处理的待测样本,然后依次加入兔抗人C5a-IgC多克隆抗体和过氧化物酶标记的猪抗兔IsC,再加入底物2,2’-连氮-双(3-乙基苯骈唑啉-6-磺酸盐)(ABTS)和H2O2显色,于酶标仪405 mn处测定每分钟光密度增加量(OD/min),以OD/min为纵坐标,C5a标准晶浓度为横坐标绘制标准曲线图,求出待测样本中C5a的含量。 二、实验试剂 1. PBSPH7.2
问:现在我用的南京建成的试剂盒来测脂肪酶,可是结果可以说是乱七八糟,一点也不稳定,这个问题也咨询过几位师兄,也有类似情况发生。不知道各位战友有没有碰到过这种情况?可有解决办法或者其他的测定方法?能否传授一下小弟?不胜感激! 答:我也用过南京建成的试剂盒,结果和你一样,看来试剂盒测脂肪酶还很不成熟。你可用常规方法(聚乙烯醇橄榄油乳化法),方法简单可靠,到处都能查到此方法。 答:乙烯醇的办法我试过,用国产试剂效果还是不好。建议用sigma的橄榄油,不过价格很贵。 实验方法如下:Lipase
【摘要】 以自制特异性抗体为核心试剂,建立了以苯甲醛为衍生试剂的呋喃唑酮残留标示物间接竞争ELISA方法。通过方阵滴定法和间接竞争法确定ELISA方法最佳反应条件:抗原最佳包被浓度200 μg/L,抗体最佳稀释倍数1∶2.5×105,抗体与药物最佳工作配比40 μL∶60 μL,最佳竞争时间1 h。检出限为0.1 μg/L,检测范围0.1~25.6 μg/L,线性关系良好。在空白组织中(猪肌肉、猪肝脏、鸡肌肉、鸡肝脏、鱼肉)添加0.4、1.0和5.0 μg/kg AOZ,回收率55
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