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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
- 规格:
96T
产品货号:XFP41231
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验;2、IEC离心机;3、研磨机;4、涡旋混合器;5、恒温孵育器:85+1℃ ;6、闪烁液加液器;7、50mL离心管;8、硼硅玻璃试管及试管塞;9、药片压杆。(二)样品和试剂1、基质:饲料;2、试剂:磺胺类Charm II检测试剂盒、闪烁液(Optifluor)、多抗标准品、MSU缓冲液、缓冲溶液M,以上试剂均由美国Charm 公司提供。3、萃取缓冲液:用分析纯盐酸配成的0.1 mol盐酸溶液和分析纯的甲醇,按1:1的比例混合配成。4、磺胺类药物标准品:磺胺二甲基嘧啶(SM2)、磺胺甲基嘧啶(SM1)、磺胺
消化法原代培养兔胸主动脉平滑肌细胞用DMEM配0.2%的1型胶原酶(用20的血清的DMEM配可能更好,有类似文献),分装于青霉素小并,每并2-3ml。1只免的胸主动脉置于1瓶消化液中消化,消化约10几个小时(消化程度的把握要体会),离心后,接种(若见细胞量大,成功把握大),绝对静置3天(没必要看,看多了无益),8天可传代。犬胸主动脉平滑肌贴块法——方法成熟,比消化法好控制的多。1、取材过程要快,取好放4度储存的D-hanks液带入超净台,不然先天不足;2、块大小密度影响不是很大(尽量小),关键
。SuperClean(Cat. No. SMC-25,etc.),SuperAmine (Cat. No. SMM-25,etc.)和SuperAldehyd(Cat. No. SMA-25,etc.)三种规格可偶联核酸、蛋白、甚至细胞,且偶联过程可以在室温及中性条件下进行。 Clontech提供的DNA-Ready Type I Slides(Cat. No. 7880-1,5 slides/box)是氨基修饰的,能结合200bp-10kb的修饰和未经修饰的DNA,DNA-Ready Type II
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