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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
- 规格:
96T
产品货号:XFP40886
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验,细胞在其中的生长速度更高,而且没有任何外源生长因子。 图1. 组织脱细胞概览。脱去猪源器官(肝、肺、心等)中的细胞,溶解剩余的天然组织特异性ECM成分并冻存备用。这种dECM水凝胶可用于传统的2D ECM包被,也可用于包裹细胞进行3D细胞培养。 我们的组织特异性dECM脱细胞基质水凝胶试剂盒是从多种健康猪器官(骨、心、肝、肾、肠、皮肤和肺)中提取出来的一系列天然脱细胞基质(dECM)。这种dECM水凝胶可用于传统的2D ECM包被,也可用于包裹细胞进行3D细胞培养,性能均高于同类水凝
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腹腔麻醉-->剖腹-->门静脉插管-->D-Hanks'液灌注,同时剪开下腔静脉-->灌以胰酶消化液-->离体肝脏并剪碎-->继续消化-->以尼龙网过滤-->450 g X 5'(4度,下同)-->ppt以HBSS重悬-->混以Nycodenz液-->转至离心管,并覆以HBSS-->1450 g X 16'-->取界面细胞-->重悬、离心收集细胞-->细胞计数,并判断存活率和产量-->按照常规接种-->次日换液。 传代方法:弃培液-->以D-Hanks'液洗两次-->0.125%胰酶(原代最好加0.05
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