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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
- 规格:
96T
产品货号:XFP40784
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验GAPDH抗体|GAPDH抗体大全-艾美捷指导您购买合适的GAPDH抗体
等也是最常见的内参抗体 。GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个30-40kDa的亚基组成,分子量146kDa,检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达,广泛用作Western blot蛋白质标准化的内参。 选择合适的GAPDH抗体显得尤为重要,首先GAPDH的WB检测条带大约为36kDa,因此对于一些待检测分子量大于40kDa或者小于30kDa的目的蛋白尤为合适。一般来说,国产的抗体在质量稳定性、效价等方面存在不足
0.4、1 .0和5.0 μg/kg的AOZ,同一份样品分别用本ELISA方法和德国试剂盒测定,结果见表3。本方法回收率(61.0%~92.5%)接近德国试剂盒(75.2%~127.5%)水平,均属于正常波动范围。但ELISA方法在高浓度回收率(61.0%)低于德国试剂盒水平(76.4%),其原因可能是本方法的样品提取效率低于德国试剂盒样品提取效率,因此有必要对本方法样品提取程序作进一步的探索。 图4 空白猪肝脏(A)和肝脏样品(B)色谱图(略) Fig.4 Chromatograms
最畅销的内参抗体✦ GAPDH (1D4) AntibodyNB300-221物种:人、小鼠、大鼠、猪、禽、牛、鸡、马、鼠、负鼠、灵长类动物、羊、斑马鱼应用:WB, Simple Western, ICC/IF, IHC, IP, ChIP✦ Beta Actin (AC-15) AntibodyNB600-501物种:人、小鼠、大鼠、猪、牛、犬、鸡、猫、鱼、豚鼠、地鼠、水蛭、哺乳动物、灵长类动物、兔、羊、鼠、斑马鱼、果蝇应用:WB, Simple Western, ELISA, Flow, ICC
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