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48T
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文献和实验消化液 1、0.1%胰蛋白酶 试剂:胰蛋白酶 0.1gm 0.1%氯化钙(pH7.8) 100ml 配制方法:先配制0.1%的CaCl2,用0.1mol/L的NaOH将其pH调至7.8,然后加入蛋白酶溶解之。用前将胰蛋白酶消化液在水浴中予热至37℃(载有标本的玻片也在TBS中予热至同样样温度)。该消化液时间约为5~30min。 2、0.4%胃蛋白酶 试剂:胃蛋白酶 400mg 0.1N HCl 100ml 配制方法:同胰蛋白
等),这些溶液都能促使蛋白质凝固。它们最初只是光学显微镜通用的固定液,但在免疫细胞化学上用其它方法不成功时,也可试用。总之,掌握一个原则,免疫细胞化学中,含重金属的固定液禁用(但Zenker-Formalin可进行短时的固定)。目前多数认为,对生物标本较好的固定措施是:用4℃的Karnovsky’s液灌注固定10~30min后,接着在pH7.3、0.1mol/L的二甲胂酸钠缓冲液中漂洗过液,这种短时冷固定处理,有助于超微结构和许多肽类抗原的保存。对其它较难保存的抗原可尝试PFG、PLP及Zamboni’s液
也在TBS中予热至同样样温度)。该消化液时间约为5~30min。 2.0.4%胃蛋白酶 试剂:胃蛋白酶 400mg 0.1N HCl 100ml 配制方法:同胰蛋白酶。消化时间在37℃约为30min。 3.0.06% Pronase 试剂:Pronase 0.06g 0.05mol/L TB(pH7.5) 100ml 配制方法:同前。 在免疫细胞化学染色中,有时经
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