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48T
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
Human白细胞分化抗原CD40配体(CD40L/TNFSF5)ELISA Kit
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
Human白细胞分化抗原CD40配体(CD40L/TNFSF5)ELISA Kit5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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文献和实验白细胞分化抗原及其功能 CD40L 即CDl54分子,属于TNFSF成员,为Ⅱ型膜蛋白。 人CD40L主要表达在活化的CD4+T细胞以及部分CD8+T细胞和YaT细胞。此外,CD40L还表达于活化的嗜碱粒细胞、肥大细胞、NK细胞、某些单核细胞以及活化B细胞。静止淋巴细胞不表达CD40L。CD40L往往以三聚体形式结合三聚体的CD40分子(TNFR超家族成员)发挥生物学作用,即传递B细胞活化的第二信号(见第九章)。缺少第二
80年代初以来,由于单克隆抗体,分子克隆、基因转染细胞系等技术在白细胞分化抗原研究中得到广泛深入的应用,有关白细胞分化抗原的研究和应用进展相当迅速。在世界卫生组织(WHO)和国际免疫学会联合会(IUIS)的组织下,自1982年至1993年已先后举行了五次有关人类白细胞分化抗原的国际协作组 会议 (International workshop on human leukocyte differentiation antigens),并应用以单克隆抗体鉴定为主的聚类
大多数白细胞分化抗原在生物进化中具有保守性,这是不同种属动物执行相同或相似生物学功能的需要。小鼠是免疫学研究中最常用的实验动物,而且对某些人白细胞分化抗原的结构和功能的了解首先是从小鼠或小鼠源性的细胞实验模型得知的。目前已有小鼠CD编号及鉴定出的相应mAb(见附表1),但在应用小鼠CD分子或mAb时应注意以下三方面问题。(一) 某些人CD分子尚未在小鼠中确定迄今为止,约有30多个人CD分子尚未在小鼠中鉴定出,包括:CD15、CD17、CD39、CD42、CD46、CD52、CD57、CD
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