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- 文献和实验
- 技术资料
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5
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96T
产品货号:XFR60008
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人 26S 蛋白酶体 (26S PSM)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液、唾液生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 26S PSM 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 26S PSM 与单抗结合,加入生物素化的抗人 26S PSM
的生理性底物p21和a-synuclein和稳定的GFP被潜在的关闭20S蛋白酶体和活性的开放蛋白酶体26S进行降解的过程。其中20S是蛋白酶体的核心,26S是20S蛋白酶体加上PA700的调控性帽子所形成的。 他们发现p21和a-synuclein能有效的被20S和26S蛋白酶体进行降解,而GFP在两种条件下都不被降解。20S的蛋白酶体不能降解短的肽段,但它能有效的降解p21和a-synuclein的现象说明,未折叠蛋白自身就能开放某些活性的酶切位点,使得蛋白酶体能够有效
ELISA是一种免疫测定。免疫测定(immunoassay,IA)是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。一、抗原抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。抗原进入机体后,可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。在免疫测定中,抗原是指能与抗体结合的物质。能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000的蛋白质。小分子化合物在与大分子蛋白质结合后能引起机体产生特异性抗体的,称为半抗原(hapten)。例如某些激素、药物等。抗原的反应性取决于抗原
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