兔原代肝实质细胞

随着人们生活水平的提高，饮食习惯的改变，肿瘤发病率也在不断的增加，如肝癌、胃癌和大肠癌等明显增加的趋势。肝脏作为人体重要的器官，在整个物质代谢过程中具有广泛而多样的功能。肝脏也是体内药物代谢的重要器官，体内复杂的环境对药物代谢等的影响是不言而喻的。但是在体研究药物或其它化学物质在肝细胞代谢的分子机制有一定的困难，因此我们建立体外的原代肝细胞培养模型用于肝细胞分子生物学特征的研究，作为对在体肝脏研究模型的有益补充。采用改良的灌流方法将肝脏中的肝实质细胞分离、纯化、体外培养，全面分析原代肝细胞的生长和功能状态，为肝细胞分子生物学特征的研究以及新药对肝脏的作用机制的研究提供更有价值的线索，以更好的解释药物作用的机制。

AOLEWIS  专注于细胞及系列产品的研发、生产和服务，并提供专业细胞技术服务外包的技术企业。公司主要研发生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础培养基、完全培养基、辅助试剂等系列产品，提供细胞及培养配套产品一站式采购服务；细胞库储存细胞系1309余种，同时通过不间断引种细胞扩大丰富细胞种类；公司还提供人源、小鼠源细胞系的近期STR鉴定，其他种属细胞的种属鉴定服务，细胞标志物检测，污染检测等细胞相关实验服务。公司细胞业务覆盖国内各大高校生物实验室、生物研究机构及一些生物科研、诊断、制药公司，不断为广大科研工作者提供优质的产品和服务！

注意事项↓ 悬浮细胞漂浮的处理方法 注意:瓶中运输培养基不能继续使用，请换用按照说明书培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。培养悬浮细胞建议用未经TC处理的培养瓶。 1.收到货发现有任何异常现象、污染、漏液、细胞漂浮等，请拍照记录，并及时联系我们销售人员或技术支持; 2.用 75% 酒精擦拭瓶身，封口膜可以不用撕去，将 T25 瓶置于培养箱中静置 2~4h 后进行操作;悬浮细胞请将培养瓶竖立在培养箱中静置。在此期间，请查看说明书以确定细胞属性; 3. 静置4h后，请将瓶内所有细胞收集至6个15ml的离心管110g(1000rpm)离心3min,将所有离心后的细胞沉淀收集到一个T25培养瓶内，平放10分钟，镜下观察细胞密度，拍照记录后放入培养箱中继续培养，第二天密度达到80%即可传代; 4.悬浮细胞传代方法:观察细胞无碎片无死细胞的情况下，建议直接加入新鲜完培直接分瓶即可。

贴壁细胞漂浮的处理方法 注意：部分细胞由于贴壁松散，会出现运输后漂浮，冬天气温低时也会出现细胞收缩漂浮，属于不可避免 因素，正确处理后均可以正常生长。 1 .将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管，离心收集细胞(1200rpm约250g-300g离心力，离心 3-5min)去除旧培养基; 2. 用PBS重悬细胞，将所有细胞收集到一个离心管中，再次离心(1200rpm约250g-300g离心 力，离心3-5min)去除PBS; 3 .加入1ml左右胰酶EDTA溶液，0.25%重悬细胞，混匀即可，建议震动离心管混匀，避免吹打细 胞，放入培养箱消化细胞，根据细胞特性决定消化时间(TM3、TM4、293 系列约1~2分钟); 注意：部分细胞不能使用胰酶消化，请注意查看细胞说明书;单颗漂浮的细胞不需要胰酶处理。 4. 消化好后，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，使细胞团分散，迅速加入3-5ml含10%以上血清的培 养基混匀终止消化，离心(1200rpm 3min)去除胰酶; 5.加入5ml左右的细胞完全培养基混匀，按比例接入无菌培养瓶中; 6. 显微镜下观察细胞是否成均匀分散的单颗细胞，若有3-5个成团的小细胞团可不用重新消化，使 之贴壁后待细胞生长稳定后再次传代消散细胞。

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