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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
广州华韵生物科技有限公司
- 运输方式:
常温/干冰
- 规格:
T25/瓶
兔晶状体上皮细胞
Cat NO.: CP-Rb004
1.产品名称:兔晶状体上皮细胞
2.组织来源:晶状体组织
3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
兔晶状体上皮细胞分离自晶状体组织;晶状体源自胚胎发育外胚层,仅含有上皮细胞及其产物,晶状体囊膜作为屏障将晶状体与其它类型细胞完全分开;因而,晶状体上皮细胞培养既无神经和血管组织的干扰,又不受其它类型细胞如成纤维细胞的污染,保证了培养中细胞成分的单一性。晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡,包括电解质和液体的输送。在正常的发育过程中,晶状体上皮细胞分化和成熟,然后迁移到晶状体内部,产生晶体蛋白,自身也拉长而变成晶状体纤维细胞,并最终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明,晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控,包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形,呈单层生长、连成膜状。晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞,其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关,体外培养是研究其生长规律的主要手段。
5.方法简介:
华韵实验室分离的兔晶状体上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
6.质量检测:
华韵实验室分离的兔晶状体上皮细胞经BFSP2(晶状体蛋白)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
7.培养信息:
| 包被条件 | 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) |
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
| 产品货号 | CM-Rb004 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 传代特性 | 可传2-3代 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
兔晶状体上皮细胞体外培养周期有限;建议使用华韵配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
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文献和实验显著下降,转变成成纤维细胞形、三角形和长形。3、个人体会:晶状体上皮细胞位于晶状体前囊膜及赤道部囊膜下,单层排列,没有其他细胞成分,是绝对的单一细胞培养。但细胞数量少较难贴壁。所以采用先置于培养瓶待其贴壁后翻转浸入培养液。另外要注意将囊膜剪小,上皮面向下,操作时有点难度的。培养基没什么特别的,用小牛血清也可以,但生长较慢。一般把多个囊膜置于同一培养瓶加大组织密度,效果较好。个人认为最好不用酶消化法,因为本来细胞就很少了。
实验材料: 1. 正常兔晶状体组织; 2. 不含Ca 2+ 和Mg 2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 注射器; 4. 培养器具:培养瓶或皿( 用多聚赖氨酸包被)、眼科剪、镊子等; 培养方法: 1. 空气注射处死大兔,在无菌条件下清除巩膜外肌肉及结缔组织后将眼球浸入含双抗的1×PBS(pH7. 2 )浸泡5min ,移入超净工作台内; 2. 用含双抗的1×PBS(pH7. 2 )冲洗 组织
), 于5℅CO2 培养箱, 37℃培养。期间倒置显微镜下观察细胞的生长状况。 ②传代培养:当神经球直径大约100um时收集细胞于离心管中,600转离心5分钟,弃上清,加入无血清培养基重悬细胞,吸管轻轻吹打细胞,使之形成单细胞悬液,计数后以104个/ mL接种75mL培养瓶中,于5℅CO2 培养箱, 37℃培养,完成一次传代。此后每隔两天半量换液,5-7天机械分离细胞传代1次。期间倒置显微镜下观察细胞的生长状况。 兔晶状体上皮细胞培养方法和体会: 1、原代培养:健康成年白家兔空气栓塞处死,立即取出
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