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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
广州华韵生物科技有限公司
- 运输方式:
常温/干冰
- 规格:
T25/瓶
| 名称 | RAW 264.7 (小鼠单核巨噬细胞白血病细胞) (STR鉴定正确) |
| 别称 | RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7 |
| 种属 | 小鼠 |
| 生长特性 | 贴壁细胞,不用胰酶消化 |
| 细胞形态 | 不规则形 |
| 生长培养基 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
| 冻存条件 | 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
| 推荐传代比例 | 1:6~1:8 |
| 推荐换液频率 | 2~3次/周 |
| 注意事项 | 1、该细胞不建议使用胰酶消化,胰酶会刺激分化; 2、 超过3天不传代细胞容易分化; 3、 培养时,存在少量分化细胞,属于正常现象。 |
| 背景描述 | RAW 264.7细胞源自Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原阴性。RAW 264.7细胞不分泌可检测到的病毒颗粒,XC斑点形成试验阴性。RAW 264.7细胞可以胞饮中性红并吞噬乳胶颗粒与酵母聚糖,并且可以抗体依赖性地分解绵羊红血球与肿瘤靶细胞。LPS或PPD处理2天可诱导RAW 264.7细胞分解红血球,但对肿瘤靶细胞无作用。 |
| 年龄(性别) | 雄性,成年 |
| 组织来源 | Abelson鼠科白血病病毒诱导的肿瘤;单核细胞;巨噬细胞 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 肿瘤类型 | 白血病细胞 |
| 生物安全等级 | 2 |
| 倍增时间 | ~12-30小时 |
| 受体表达情况 | complement (C3) |
| 抗原表达情况 | H-2d |
| 基因表达情况 | lysozyme, H-2d; Tested and found negative for ectromelia virus (mousepox). |
| 保藏机构 | ATCC; TIB-71 ECACC; 91062702 |
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文献和实验RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢,普通的方法根本就不可能将它消化下来,这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得,简介如下:消化液:0.5%胰酶、0.2%EDTA,实验前加温到37度以50ml培养瓶为例:1、细胞贴壁生长,长满瓶底80%时,弃去培养液,加D-HANKS 漂洗 两次;2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1-2ml,消化37℃约2-5min,镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化,弃消化液加D-HANKS 漂洗两次;3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
细胞学堂丨养不好RAW 264.7,是因为忽略了这几点,RAW264.7分化有哪些问题要注意
和培养器皿的材料也有关,有时RAW264.7细胞会出现太容易吹下的情况,连分化细胞都贴壁较松,此时更适宜用巴氏管吹打; 4. 培养时,无法保证100% 不分化,通过传代可以将分化比例控制在一定范围 5. RAW264.7细胞分裂活跃,记得每天看一看,周末也要抽点时间关心一下它哦~ 小知识 RAW 264.7细胞系的起源 加利福尼亚索尔克研究所的W. C. Raschke在雄性BAB/14小鼠腹腔注射A-MuLV(Abelson鼠科白血病病毒)诱发肿瘤的腹水中建立了RAW 264细胞
MOI 值 50-200,puromycin 常规剂量 1-2 µg/mL;一般不需要加助转剂 polybrene。 ②Jurkat 细胞 Jurkat 细胞是一种常用的人类T细胞白血病细胞系,是一种悬浮细胞。慢病毒感染悬浮细胞步骤可以参考上文。 Jurkat 细胞感染慢病毒的 MOI 以 50-80 为宜,一般不需要加助转剂 polybrene。 图 6:慢病毒感染 Jurkat 细胞 ③RAW264.7 细胞 RAW264.7 中文全名为小鼠单核巨噬细胞白血病细胞,属贴壁细胞,最好的形态呈现
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