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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
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96T
产品货号:XFG70408
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验。epoxomicin 处理后,通过四种不同方法处理 HeLa 细胞裂解物 (150 g)。将得到的流穿 (F) 和洗脱 (E) 馏分进行体积归一化,与原始未处理裂解物 (H) 进行体积归一化,并选择相同体积进行蛋白印迹检测。与供应商 Cs kit 和基于抗体的方法相比,thermo Scientific Pierce 泛素富集试剂盒在洗脱组分中获得了更多的泛素化蛋白(在流穿组分中获得的蛋白较少),表明泛素化蛋白的富集效果明显更好。GSH 树脂是用于比较的阴性对照。4、S-nitrosylation: 一氧化氮
分析仪测定总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、球蛋白(Glb)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)等。 (二)氧化抗氧化物质测定:采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒分别检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)。 (三)大鼠肝脏病理检查:大鼠处死后立即取出肝脏,称重后一部分以10%的福尔马林液固定作病理,作常规石蜡切块并HE染色,在光学显微镜下进行观察,用半定量法分别判定
分析仪测定总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、球蛋白(Glb)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)等。 (二)氧化抗氧化物质测定:采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒分别检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)。 (三)大鼠肝脏病理检查:大鼠处死后立即取出肝脏,称重后一部分以10%的福尔马林液固定作病理,作常规石蜡切块并HE染色,在光学显微镜下进行观察,用半定量法分别判定
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