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48T
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
HumanRho GDP解离抑制因子α(ARHGDIα)ELISA Kit
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
HumanRho GDP解离抑制因子α(ARHGDIα)ELISA Kit5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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文献和实验,对某些传染病如甲型肝炎有较高的临床诊断价值。 抗原抗体反应 1. 可逆性 抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物的过程是一种动态平衡,其反应式为: Ag+Ab→Ag·Ab 抗体的亲和力(affinity)是抗原抗体间的固有结合力,可以用平衡常数K表示: K=[Ag·Ab]/[Ag][Ab] Ag·Ab 的解离程度与K值有关。高亲和力抗体的抗原结合点与抗原的决定簇在空间构型上非常适合,两者结合牢固,不易解离。解离后的抗原或抗体均能保持原有的结构和活性,因此可用亲和层析法来提纯抗原或抗体。在抗
ws88523758 小弟对于实验处于纯菜鸟,糊里糊涂的做了半年多了,结果数据参差不齐,临近毕业,焦虑万分,特停高手们指导求救! 我做的是大鼠的系膜细胞,用TNF-α刺激后,再用中药干预24h,测细胞上清中的ikb和NF-KB,用的都是ELISA法。 ikb测值很低,据查当IKBα被磷酸化后分解后,P65和P50才能解离激活。所以,当刺激开始的时候,磷酸化的IKBα上调,IKBα下调。由于P65活化后又可以上调IKBα表达,所以,经过一定时间之后
ELISA是一种免疫测定。免疫测定(immunoassay,IA)是应用免疫学技术测定标本的方法。在临床检验中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。一、抗原抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。抗原进入机体后,可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。在免疫测定中,抗原是指能与抗体结合的物质。能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000的蛋白质。小分子化合物在与大分子蛋白质结合后能引起机体产生特异性抗体的,称为半抗原(hapten)。例如某些激素、药物等。抗原的反应性取决于抗原
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