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5
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96T
产品货号:XFC81783
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验硝基苯亚甲基)2氨基222恶唑烷酮(NPAOZ),通过检测NPAOZ达到检测AOZ的目的。目前检测AOZ残留的方法有LC2UV[6]、LC2MS[7]和LC2MS2MS[8],我国检测呋喃唑酮标准主要有HPLC(SC/T 302222004)、HPLC2MS(GB/T 18932.2422005)。该类技术所需设备要求较高,不适合高通量样品筛选[9]。酶联免疫吸附法(ELISA)具有灵敏度高、特异性好、成本低等特点,适于高通量样品筛选。德国Bio2pharm公司研发出AOZ酶联免疫试剂盒[10
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,其优势是显而易见的。因此定量检测细胞因子成为目前液相芯片技术应用最为活跃和广泛的领域之一,尤其是2004年以来,随着市场上越来越多的商品化试剂盒的涌现,液相芯片技术检测细胞因子的文献报道数量迅猛增加,大有取代常规ELISA方法之势。 de Jager[1]自行制备抗体交联微球,同时检测了人血浆和关节滑液中的30种细胞因子、趋化因子和粘附分子,其检测灵敏度为1.0~26.4 pg/ml,检测范围达4个对数值;检测添加上述分子正常人血浆的回收率为83%~119%,平均批内变异系数为8.1%
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