- ￥1260
- gemig
- XFC81727
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
5
- 规格：
96T
产品货号：XFC81727
产品规格：96T
储存条件：2-8℃
有效期：6个月
本产品仅供科研实验用，不做其他用途！
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免
反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验于阴性反应。如抗原为高纯度的，可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质，直接包被不易成功，可采用捕获包被法，即先包被与固相抗原相应的抗体，然后加入抗原，形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质，然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式，可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合，抗HBc ELISA一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合，洗涤后再加入酶标抗体，与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此方法。 5.竞争法测抗原 小分子抗原或半抗原因缺乏
呈色的强度取决于反应中酶结合物的浓度和加入竞争抑制物的量。 竞争法 ELISA 不易用自视判断结果，因肉眼很难辨别弱阳性反应与阴性对照的显色差异，一般均用比色计测定，读出 S、P和 N 的吸光值。计算方法主要也有两种，即阳性判定值法和抑制率法。 a. 阳性判定值法 与间接法和夹心法中的阳性判定值法基本相同，但在计算公式中引入阳性对照 A 值，现举某种检测抗 HBc 的试剂盒为例。试剂盒中的阴性对照为不含抗 HBc 的复钙人血浆，阳性对照中抗HBc含量为 125±1 00u/ml。每次试验设
5a和NS5b）区，合成抗原的优点是易于纯化，特异性好，抗原抗体反应强。 2.1.1 第一代抗HCV-Elisa试剂盒： -由美国ortho公司克隆C1003抗原几个片断与人超氧化物歧化酶（SOD）结合。用酵母从病毒基因组非结合区得到表达，表达为融合蛋白，亦作为包被固相载体。 -抗原组合：NS4 区二个基因片断为NS 5-1-1和C1003 -特性：IgG抗C100在发病后数月后，才检出，故不宜作早期诊断。 -约由20%的病人不出现抗体。IgM抗-C100急性期检出率只有64
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