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- 文献和实验
- 技术资料
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5
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96T
产品货号:XFC80263
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验恩泽康泰进军家畜外泌体研究领域——全面解锁猪/牛/羊/鸡外泌体研究
/靶向肽修饰/细胞上清浓缩等工程化改造试剂盒,从最初的血浆等体液外泌体研究到时下最新的组织外泌体研究,从最初的外泌体电镜/粒径/WB三项基本表征到十余项外泌体质量检测体系,从最初的外泌体RNA组学/全转录组学到如今的集外泌体RNA全转录组/外泌体蛋白质组/外泌体代谢组学的Exoomics®外泌体多组学服务平台,从最初的thermo Q-E HFX平台普通外泌体lable-free蛋白质组学到集普通外泌体lable-free蛋白质组/4D lable-free蛋白质组/普通direct-DIA蛋白
确的。因此,推荐先确定样本的线性范围,可稀释样本来创建标准曲线。根据标准曲线来鉴定饱和点和所需的总蛋白量。✦ 表达强度及稳定性确保选择的内参在样品中高表达。大多数常用的内参蛋白是由保守基因高表达的,这些保守基因是细胞发育及维持细胞活力所必须的(即看家基因)。此外,还应该选择表达不受实验变量影响的内参。最佳的内参应当不受样本来源(如正常和疾病样本)、实验条件的影响。例如,GAPDH 不适用于氧相关研究,因为缺氧可能上调 GAPDH 的表达。✦ 常用的内参蛋白大小及使用注意事项请见如下表格:WB 中如何使用内参
。 二、致病性与免疫性 (一)致病物质 金葡菌产生多种毒素与酶 1.血浆凝固酶(Coagulase)是能使含有枸椽酸钠或肝素抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质,致病菌株多能产生,常作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要标志。 凝固酶有两种:一种是分泌至菌体外的,称为游离凝固酶(Free coagulase)为蛋白质。作用类似凝血酶原物质,可被人或兔血浆中的协同因子(Cofactor)激活变成凝血酶样物质后,使液态的纤维蛋白原变成固态
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