- ￥1260
- gemig
- XFC80077
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
5
- 规格：
96T
产品货号：XFC80077
产品规格：96T
储存条件：2-8℃
有效期：6个月
本产品仅供科研实验用，不做其他用途！
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免
反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验Q：Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么？ A：Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合，将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合，并产生强烈的荧光，正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性，核染料 PI 或 7-AAD
，否则基因组 DNA 裂解成小片段，有可能对质粒造成污染。SDS 作用是结合蛋白质，为下一步做准备。5. 加 150μl 用冰预冷的溶液 Ⅲ，盖紧管口，将管倒置后温和地振荡 10 秒钟，使溶液 Ⅲ 在粘稠的细菌裂解物中分散均匀，之后将管置于冰上 3-5 分钟。溶液 Ⅲ5 mol/L 乙酸钾 60 ml冰乙酸 11.5 ml水 28.5 mlTips：这一步主要作用是中和，避免质粒长时间在碱性条件下造成损伤，此时质粒溶解在中和液上清中。SDS 的钾盐是不溶于水的，也直接导致与之结合的蛋白质沉淀，由于基因
细胞因子 >>> 分装 ELISA 试剂盒 货号 品名 方法 规格 价格 备注 F10000 小鼠血管紧张素转化酶 (mouse ACE) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口分装 F10001 小鼠雄激素结合蛋白 (mouse ABP) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口分装 F10002 小鼠促肾上腺皮质激素 (mouse ACTH) ELISA 48T/96T 1800/2800 进口分装 F10010 小鼠 Active
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