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兔原代滑膜成纤维细胞

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  • 兔原代滑膜成纤维细胞
  • 2025年07月12日
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      蒂科生物

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    • 英文名

      兔原代滑膜成纤维细胞

    • 生长状态

      贴壁生长

    • 运输方式

      T25/冻存管

    • 细胞形态

      成纤维样细胞样

    • 组织来源

      关节组织

    • 规格

      T25

    滑膜是关节囊的内层,淡红色,平滑闪光,薄而柔润,由疏松结缔组织组成。关节腔内的所有结构,除关节软骨、半月软骨板以外,即便是通过关节腔的肌腱、韧带等均全部为滑膜所包裹,滑膜分泌滑液,在关节活动中起重要作用。正常滑膜分为两层,即薄的细胞层(内腔层)和血管层(内膜下层),是血管丰富的关节囊内膜,贴附于非关节面部分,覆盖于关节囊内的骨面上,不在软骨面上,此部分称为边缘区或“裸区”。滑膜呈粉红色,光滑发亮、湿而润滑,有时可见绒毛,内含胶原性纤维,滑膜细胞有A、B两型。巨噬细胞样A型细胞,表面有丝状伪足、浆膜内陷、囊泡、线粒体、溶酶体、胞浆纤维和高尔基体,具有吞噬功能;B型成纤维样滑膜细胞(FLS) ,有高浓度的内质网结构,是介导 RA 关节破坏的主要细胞。

     

    AOLEWIS  专注于细胞及系列产品的研发、生产和服务,并提供专业细胞技术服务外包的技术企业。公司主要研发生产细胞系、原代细胞、胎牛血清、基础培养基、完全培养基、辅助试剂等系列产品,提供细胞及培养配套产品一站式采购服务;细胞库储存细胞系1309余种,同时通过不间断引种细胞扩大丰富细胞种类;公司还提供人源、小鼠源细胞系的近期STR鉴定,其他种属细胞的种属鉴定服务,细胞标志物检测,污染检测等细胞相关实验服务。公司细胞业务覆盖国内各大高校生物实验室、生物研究机构及一些生物科研、诊断、制药公司,不断为广大科研工作者提供优质的产品和服务!

    注意事项↓ 悬浮细胞漂浮的处理方法 注意:瓶中运输培养基不能继续使用,请换用按照说明书培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。培养悬浮细胞建议用未经TC处理的培养瓶。 1.收到货发现有任何异常现象、污染、漏液、细胞漂浮等,请拍照记录,并及时联系我们销售人员或技术支持; 2.用 75% 酒精擦拭瓶身,封口膜可以不用撕去,将 T25 瓶置于培养箱中静置 2~4h 后进行操作;悬浮细胞请将培养瓶竖立在培养箱中静置。在此期间,请查看说明书以确定细胞属性; 3. 静置4h后,请将瓶内所有细胞收集至6个15ml的离心管110g(1000rpm)离心3min,将所有离心后的细胞沉淀收集到一个T25培养瓶内,平放10分钟,镜下观察细胞密度,拍照记录后放入培养箱中继续培养,第二天密度达到80%即可传代; 4.悬浮细胞传代方法:观察细胞无碎片无死细胞的情况下,建议直接加入新鲜完培直接分瓶即可。

    贴壁细胞漂浮的处理方法 注意:部分细胞由于贴壁松散,会出现运输后漂浮,冬天气温低时也会出现细胞收缩漂浮,属于不可避免 因素,正确处理后均可以正常生长。 1 .将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管,离心收集细胞(1200rpm约250g-300g离心力,离心 3-5min)去除旧培养基; 2. 用PBS重悬细胞,将所有细胞收集到一个离心管中,再次离心(1200rpm约250g-300g离心 力,离心3-5min)去除PBS; 3 .加入1ml左右胰酶EDTA溶液,0.25%重悬细胞,混匀即可,建议震动离心管混匀,避免吹打细 胞,放入培养箱消化细胞,根据细胞特性决定消化时间(TM3、TM4、293 系列约1~2分钟); 注意:部分细胞不能使用胰酶消化,请注意查看细胞说明书;单颗漂浮的细胞不需要胰酶处理。 4. 消化好后,用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使细胞团分散,迅速加入3-5ml含10%以上血清的培 养基混匀终止消化,离心(1200rpm 3min)去除胰酶; 5.加入5ml左右的细胞完全培养基混匀,按比例接入无菌培养瓶中; 6. 显微镜下观察细胞是否成均匀分散的单颗细胞,若有3-5个成团的小细胞团可不用重新消化,使 之贴壁后待细胞生长稳定后再次传代消散细胞。

    产品使用 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 

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    图标文献和实验
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    • 人类原代滑膜细胞传代

      我养过人类原代滑膜细胞,探讨传代经验:其实最好还是在细胞长满时、还没有接触性抑制之前传代为好1、预温0.25% trypsin, 0.02%EDTA2、用Ca-free的PBS洗涤贴壁细胞三次3、用1份0.25% trypsin, 0.02%EDTA和3份PBS室温下消化(不要用全量消化液因为对于细胞的悬浮作用不但未见有增强作用而且对细胞本身没有好处)4、在倒置显微镜下观察细胞悬浮情况,约有半数以上细胞开始漂浮就用移液管(滴管)移出,置入离心管中5、离心1000rpm,10min6、上清液移回

    • 正常滑膜细胞原代培养

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    • 人类滑膜原代细胞培养

      1500-2000转离心6分钟,最后一次用记数板观察细胞并计数。细胞最终悬浮于α-MEM含有10%胎牛血清中,接种到培养瓶中培养。8、必要时可做第三管细胞收集;并立即作原代滑膜细胞培养。9、每2-3天换液一次。体会:1、虽然国内外文献有组织块培养法获得滑膜细胞,但我试过,没有获得滑膜细胞,可能方法没掌握好或实验条件不同;2、我探索过用0.25% trypsin或0.25% trypsin+ 0.02%EDTA 或 collagenaseⅠ或collagenaseⅡ消化细胞或合用,只有单用

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