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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5
- 规格:
96T
产品货号:XFS90065
产品规格:96T
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途!
样品收集、处理及保存方法
以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中,不得使用叠-氮-钠做为防腐剂。
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
4. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免
反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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文献和实验莲芯 请各位高人指点,在RhoA-ROCK信号通路中,如何用实验解析RhoA是怎么活化的呢,并且ROCk是如何参与细胞运动的.十分感谢!急呀! dianaofyezi 可以购买相应的试剂盒进行检测活化后的RHO-A蛋白。 doctormy "如何用实验解析RhoA是怎么活化的呢",如果我没理解错的话,你的意思是解释和分析,这是试验设计的基本问题,只有结合你的课题具体思路去设计解释。
用RhoA抗体检测沉淀物中RhoA-GTP含量。试剂盒是upstate及cytoskeleton公司都有。但是区别upstate测的是活性Rho,而细胞骨架公司的测的是活化的RhoA。看了说明书,操作中要液氮,要低温,要保持RhoA的活性不被降解,而且试剂盒贵,1万元左右。 4、看了还有G-LISA的方法,用抗体与活化的RHOA结合的原理。用的是抗GTP-RhoA。 有人做过相关的检测吗?这几种方法有缺点,或者说更科学合理的道理在何处?求解,谢谢
而与p53无关。mob-1编码产物为分泌性多肽,与前炎症细胞因子家族成员IP-10同源,其意义在于将慢性炎症反应,ras的活化及癌变联系起来,并有可能成为ras发生突变的分泌型分子标志物。研究者通过微细胞介导将正常的人类6号染色体转入人类黑色素瘤细胞系Me1JuSo及其高转移亚系C1861,虽然不影响其成瘤率,但抑制其转移率至少95%,提示位于6号染色体上的基因可能调控着基因组中转移抑制基因的表达,差异显示使在基因水平探讨此显著的转移抑制作用成为可能[15]。结果发现转染后激活新基因Kiss
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