病毒保存液(非灭活型,含BSA,无色)，RC60103-50

动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制方法

室一般用1：250(GRC公司生产)。胰蛋白酶对细胞的分离效果与细胞的类型、特性和瓶壁表面特性有关。一般来说浓度大、温度高(勿高于37℃)、作用时间长，则对细胞分离能力大。但超过一定程度会损伤细胞，导致细胞传代后不能贴壁或死亡。胰酶在pH 8.0、37℃时消化能力最强。溶液中的Ca2+、Mg2+和血清会降低胰酶活力，所以配制胰酶时须用无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液。当消化结束时，可加入少量血清或含血清的培养基以终止胰酶作用。 细胞传代使用的胰酶浓度是0.25%或0.2%。用于原代细胞培养消化

动物细胞培养技术及hanks液的配制

灭菌锅、磁力搅拌器。 材料：3000ml锥形瓶、250ml或500ml培养瓶、翻冒塞、饭盒、pH试纸、孔径0.22μm的微孔滤膜。 试剂：盐酸、无离子水、小牛血清、合成培养基(RPMI1640)、青霉素、链霉素、NaHCO3。 四、 实验步骤 (一) 准备和安装滤器 在超净工作台内打开包有清洗灭菌好的过滤器的牛皮纸，并架好。胶管一段接入滤泵再插入待除菌的液体中，出口端胶管伸入到已消毒的瓶子中。用滤泵做正压过滤，压力数字为2。过滤后检查滤膜是否完好

蛋白免疫印迹（Western Blot）技术手册

有针对细胞内的不同蛋白专门的蛋白裂解液试剂盒供您选择。 4.11细胞裂解操作方法： （1）培养的细胞经预冷的PBS漂洗2次，裂解液中加入蛋白酶和磷酸酶抑制剂。 （2）吸净PBS，加入预冷的裂解液，（(1 ml per 107 cells/100mm dish/150cm2 flask; 0.5ml per 5x106 cells/60mm dish/75cm2 flask). （3）用细胞刮子刮取贴壁细胞，将细胞及裂解液温和地转移至预冷的微量离心