1.51486.0001默克卡套MANU-CART NT H

增进RNAi分析的强大工具

Complete RNAi Kit和购买到的利用RNase III 酶的试剂盒产生d-siRNA。BLOCK-iT™ Dicer Complete RNAi Kit产生的大小为21-23nt的核苷酸（泳道2），RNase III 酶的产物12-15个核苷酸（泳道3）。通过与100bp的ladder比较显示（泳道1）。（4％E-Gel） 图4 使用BLOCK-iT™ Dicer 酶比使用一种细菌RNase III 酶产生的siRNA 提供更好的结果 GripTite™ 293 MSR 细胞转染lacZ

Convenient and Efficient Approach to the Permanent or Reversible Conjugation of RNA and DNA Sequences with Functional Groups

4.6 mm, Supelco) Additional reagents and equipment for RP‐HPLC (unit 10

RNA干扰载体的构建的实验流程

的使用需要将人工设计的寡核苷酸片段插入pRI系列载体中特定的酶切位点之间，寡核苷酸片段中包含了针对目标基因的mRNA设计的长度为19nt的干扰片段。 合成时需要化学合成正向和反向两条寡核苷酸。正、反向寡核苷酸退火后与载体连接，插入载体XhoI，BglII位点之间，位于载体上H1启动子下游正确的位置上。连接后的载体转入哺乳动物细胞在H1启动子作用下转录产生shRNA。 1. 选择干扰序列 在RNA干扰实验中，RNA干扰序列的选择会显著影响RNA干扰效果。我们建议