猴 CASP7 (Caspase 7) ELISAKit

【转帖】张pupu的日记

的用8%的脱脂奶粉。bsa我很少用，主要是bsa会出现封闭不均匀的情况。我也很少用0.22微米的膜，原因是背景不干净，再者无论是封闭时间还是洗膜时间都得延长。标准教程上推荐20kd以下的分子用0.22微米的膜，我杂过最小的分子是cleaved-caspase3,12ka，按我在一楼的转膜条件，在0.45微米的膜上清清楚楚。我在上海的师弟他们转7ka的分子也用0.45微米的，没出过事。废话一句，我师弟的实验室可是国家重点，那个富呀，让我闭上眼想想吧，那可是屎壳郎掉到了化粪池的感觉。 一抗我一般4度摇床

western blot五年个人总结——“穷人的劳斯莱斯”

的分子是cleaved-caspase3,12ka，按我在一楼的转膜条件，在0.45微米的膜上清清楚楚。我在上海的师弟他们转7ka的分子也用0.45微米的，没出过事。废话一句，我师弟的实验室可是国家重点，那个富呀，让我闭上眼想想吧，那可是屎壳郎掉到了化粪池的感觉。 一抗我一般4度摇床过夜，洗膜3此，每次5分钟。要注意的是，如果一抗里添加了叠氮化钠，务必洗膜5次，每次10分钟，因为叠氮化钠会灭活二抗偶联的辣根过氧化物酶(hrp)活性。二抗我用的是中杉金桥分装的，120元一支，通常

western blot五年体会——“穷人的劳斯莱斯”

。我也很少用0.22微米的膜，原因是背景不干净，再者无论是封闭时间还是洗膜时间都得延长。标准教程上推荐20kd以下的分子用0.22微米的膜，我杂过最小的分子是cleaved-caspase3,12ka，按我在一楼的转膜条件，在0.45微米的膜上清清楚楚。我在上海的师弟他们转7ka的分子也用0.45微米的，没出过事。废话一句，我师弟的实验室可是国家重点，那个富呀，让我闭上眼想想吧，那可是屎壳郎掉到了化粪池的感觉。    　 一抗我一般4度摇床过夜，洗膜3此，每次5分钟。要注意的是，如果一抗里添加