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48T
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文献和实验性。 2)如果这时随机插入没有同时伴随正确重组,还会产生重组假阳性的风险,用探针 Probe1/2 可以避免假阳性,但部分模型定制服务商只采用 Probe3,所以在接受模型服务商提供的鉴定报告时注意判断所用探针位置。 3、Southern blot 探针至少需 300-500bp,对于使用小于该长度的 Donor 的小鼠模型无法进行检测 4、F0 代检测结果不能代替 F1 代鉴定结果: 有的小鼠模型鉴定报告,用 F0 代小鼠的 Southern 鉴定结果代替 F1 代鉴定结果,这种直接代替是不严谨的。 1)受精
。随后,才能进行杂合子小鼠的相互交配。注意点:-不同的 KO Founder 之间不能相互交配。-不同的 KO Founder 的子代之间也不建议相互交配。条件性基因敲除获得 flox 纯合同时 Cre 阳性的小鼠(f/+;Cre-)×(f/+;Cre+)→ f/f;Cre+Flox 小鼠在去除 Neo 基因以后(CRISPR/Cas9 途径获得的 CKO 小鼠省略此步骤),获得仅含有两个 loxP 位点的 flox 杂合子小鼠(flox/+,可缩写成 f/+)。 flox 杂合子(f/+)小鼠与组织
:3. 条件性基因敲除获得 flox 纯合同时 Cre 阳性的小鼠:(f/+;Cre-)×(f/+;Cre+)→f/f;Cre+这样最终可以获得 1/8 的 flox 纯合且带有 Cre 的条件性基因敲除小鼠(f/f;Cre+)。如果觉得效率过低,也可以在繁育 f/+;Cre+ 的同时,繁育 flox 纯合子(f/f),再将这两种小鼠相互交配。这样,就可以获得 1/4 的 f/f;Cre+ 敲除小鼠啦。你是不是跟着小编在回答每个问题呢?有些问题看似简单,但想要完全掌握,还真得花点时间和精力。文章开头提到
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