鸡 DKK2 (Dickkopf Related Prote

高效液相色谱柱后衍生测定鸡组织中甲基盐霉素残留量

　　【摘要】  建立了鸡组织中甲基盐霉素的高效液相色谱柱后衍生化分析方法。样品经异辛烷提取，离心后上层有机相过硅胶固相萃取小柱，洗脱液浓缩后用V(甲醇)∶V(水)=90∶10混合液溶解。采用Inertsil ODS�3 C18柱，以V(甲醇): V(乙酸)∶V(水)=94∶3∶3为流动相，香草醛为衍生剂进行高效液相色谱柱后衍生分析，520 nm检测，外标法定量。方法检出限为6 μg/kg; 定量限为20 μg/kg; 添加浓度在20~1800 μg/kg范围内，平均添加回收率为76�

根据保守区克隆基因家族的新基因遇到的问题特来请教

我的题目是鸡Mx基因的克隆，我的策略是先根据该基因家族(dynamin family)的氨基酸保守区设计简并引物克隆出该基因cDNA的部分片段，然后根据该片段序列设计基因特异性引物，利用RACE技术得到cDNA的3‘和5’末端，然后根据末端序列设计引物扩增出该基因全长cDNA. 我用简并引物从鸡cDNA中扩增出一个片段，约250bp, 测序后拿来BLAST时却发现，与之同源性最高的并不是其它的Mx基因，而是人的某一个基因，比对的结果中与该序列同源性较高的有人及鼠Mx基因，但是同源性并不

二级抗体的作用

二级试剂的作用是信号扩增，选择是根据一抗的标记形式而决定的，对于无标记的一抗，可以选择对应一抗来源种属的标记二抗，或者更便宜的标记蛋白A（来自金黄葡萄球菌Protein A可以高度亲和来自人，医学教育网搜|集整理兔，豚鼠的IgG，但对大鼠、山羊和鸡的IgG亲和力弱）。不过，二抗是更可靠的选择——除了要选择对应一抗的来源种属，也要根据你准备采用的检测方法选择合适的标记。