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- 文献和实验
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- 保存条件:
室温,避光,12个月
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现货
- 供应商:
鹿森生物
- 规格:
500ml
用途:轻工业部标准法DNS试剂。又称3,5-二硝基水杨酸法或简称DNS法,DNS试剂是植物总糖和还原糖检测(硝基水杨酸法)的成分之一,定量检测植物组织样品中的总糖和还原糖的含量。
注意事项:检测原理是还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸,3,5-二硝基水杨酸被还原为棕红色的氨基化合物。在一定范围内,还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈一定比例关系。在540nm处测定棕红色物质的吸光度,该吸光度值与还原糖含量呈线性关系。
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文献和实验计算出底物消耗速度或产物生成速度,将速度换算为μmol/min即是以国际单位表示的酶活性。 例如: 假设某一样品种的酶活性记为X U/L,取样品量VS(mL)与底物缓冲液Vr(mL)孵育,t min后加入终止液Ve(mL),检测到的净吸光度增加为A,该产物的摩尔消光系数为ε(一般可通过带标准求得),比色皿光径为 b cm。③ 连续监测法计算 酶与底物在特定条件下孵育,每隔一定时间(2-60 s)连续测定酶促反应过程中某一底物或产物的特征信号的变化,从而计算出每分钟的信号变化速率。连续监测法
浸泡固定2~24h。另外,该固定剂较为温和,适于组织标本的较长期保存。2、4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠试剂:A液:多聚甲醛40g蒸馏水 400mlB液:Na2HPO4•2H2O16.88g蒸馏水 300mlC液:NaOH 3.86g蒸馏水 200m配制方法:A液最好在500ml的三角烧瓶中配制(方法同前),至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。B液和C液配制好后,将B液倒入C液中,混合后再加入A液,以1n NaOH或1N HCl 将pH调至
-硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系,利用分光光度计在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线并计算,便可求出样品中还原糖和总糖的含量。由于多糖水解为单糖时,每断裂一个糖苷键需加入一分子 水,所以在计算多糖含量时应乘以系数0.9。 三、DNS试剂的制备 将6.3克DNS和262ml 2mol/L氢氧化钠,加到500ml含有182克酒石酸钾钠的热水溶液中,再加上5克重苯酚和5克亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加水定容到1000ml,即制成
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