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上海富雨生物
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人或动物
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常温或干冰
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- 规格:
1×10^6cells/T25
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种属 |
人 |
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别称 |
MDA-MB-468+RFP |
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组织来源 |
乳房 ;乳腺 |
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疾病 |
乳腺癌 |
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传代比例/细胞消化 |
1:2传代 ,消化5-6分钟 |
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完全培养基配置 |
Leibovitz' s L-15培养基 ; 10%胎牛血清 ; 1%双抗 |
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简介 |
该细胞是1977年由CailleauR等从一位患有转移性乳腺癌的51岁黑人女性的胸腔积液中分离得到的。虽然供 体组织的 G6PD等位基因杂合 ,但此细胞株始终表现为G6PDA表型。 P53基因273位密码子存在G→A突变 , 从而导致Arg→ His替代 。每个细胞上存在1 × 106个EGF受体。 |
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形态 |
上皮细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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倍增时间 |
每周 2至 3 次 |
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抗原表达 |
Blood Type AB; HLA Aw23 , Aw30 , B27 , Bw35 , Cw2 , Cw4 ( patient) |
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受体表达 |
epidermal growth factor ( EGF) ; transforming growth factor alpha ( TGF alpha) |
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致瘤性 |
Yes, in nude mice inoculated subcutaneously with 1 × 10 ^ 7 cells. ( Tumors developed within 2 1 days at 100% frequency ( 5/ 5) .) |
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STR |
Amelogenin :X ;CSF1PO : 12 ; D13S317 :12 ;D16S539 :9 ;D18S51 :17 ;D19S433 :12 ,13 ; D21S11 :27 ;D2S1338 :17 ,25 ;D3S1358 :15 ;D5S818 :12 ;D7S820 :8 ;D8S1179 :13 ; FGA :23 ;TH01 :7 ;TPOX :8 ,9 ;vWA :18 ; |
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培养条件 |
气相 :空气 ,100% ;温度 :37摄氏度 ,培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液 :90% FBS , DMSO 10%, 或使用非程序冻存液 |
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保藏机构 |
ATCC; HTB-13 2 |
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备注 |
该细胞推荐使用Leibovitz' s L-15培养基 ,无二氧化碳培养,该细胞是通过慢病毒转染荧光素酶的稳转株 ,收到 细胞传代8代左右后 ,若要求需要维持荧光强度 ,建议可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。 |
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产品使用 |
仅限于科学研究 ,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
常温细胞收货当天处理方式 1.收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。 2. 镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象, 方便后续 售后处理。 3. 消毒后,更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集 重新接种止培养瓶。 4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定), 首次传代推荐比例 1:2 到 1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定 可联系技术支持);若细 胞密度不到 80%则可继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收 集细胞。 5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代 (参考附件),或及时联系技术支持进行指导传代。 贴壁细胞传代:1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃; 2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次 3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的胰酶;胰酶量应足以覆盖细胞层 (T25为1ml); 4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异); 5.在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间延长几分钟,每 30 秒 钟检查一次解离情况; 6.细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍 体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散; 7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中,以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟 (请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异); 8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适 量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放 入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶 盖)。 悬浮细胞传代:将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min,收集上清,加 1- 2ml 完全培养基重悬,按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中,补充5-222ml/瓶新的完全培养基 , 最后放入细胞培养箱中培养。
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data 期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16 作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1 DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
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