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现货库存
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上海富雨生物
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人或动物
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- 运输方式:
常温或干冰
- 年限:
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- 生长状态:
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- 规格:
1×10^6cells/T25
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种属 |
大鼠 |
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组织来源 |
正常结肠组织 |
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传代比例 |
1:2传代 |
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完全培养基配置 |
基础培养基500ml;生长添加剂5ml;胎牛血清50ml;双抗5ml |
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简介 |
结肠在右髂窝内续于盲肠,在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部,大部分固定于腹后壁,结肠的排列酷似英文字母“M”,将小肠包围在内,结肠横切面由内到外依次为:粘膜(上皮层,固有层,粘膜肌层),粘膜下层,肌层,外膜,结肠平滑肌细胞主要分布于粘膜肌层和肌层;结肠运动少而缓慢,对刺激的反应也较迟缓。 |
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形态 |
长梭状细胞样 |
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生长特征 |
贴壁生长 |
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细胞检测 |
平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色为阳性免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
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倍增时间 |
每周 2 至 3 次 |
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换液频率 |
2-3天换液一次 |
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培养条件 |
气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
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冻存条件 |
冻存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液 |
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产品使用 |
仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
常温细胞收货当天处理方式 1.收到常温细胞后,及时拍照记录有无漏液/瓶身破损现象。 2. 镜下观察有无微生物污染现象,拍照记录不同倍数镜下细胞状态和有无染菌现象, 方便后续 售后处理。 3. 消毒后,更换赠送的完全培养液放置培养箱静止2-3小时。如细胞有多数悬浮细胞需要离心收集 重新接种止培养瓶。 4. 观察细胞密度若超过 80%则可正常传代处理(有的原代细胞不可传代,请根据实际情况决定), 首次传代推荐比例 1:2 到 1:3(按实际收货细胞密度决定,若不确定 可联系技术支持);若细 胞密度不到 80%则可继续培养,注意拧松瓶盖或更换透气瓶盖;悬浮细胞注意离心所有培养基以收 集细胞。 5. 由于气温,运输等影响造成贴壁细胞漂浮的,请将细胞离心收集后在离心管中消化后进行传代 (参考附件),或及时联系技术支持进行指导传代。 贴壁细胞传代:1.从培养容器中吸出用过的细胞培养基并丢弃; 2.从与贴壁细胞层相对的容器一侧轻轻加入冲洗液以避免搅动细胞层,前后摇晃容器数次 3. 从培养容器中吸出冲洗液并丢弃,向培养瓶中加入预热的胰酶;胰酶量应足以覆盖细胞层 (T25为1ml); 4.将培养容器在室温下孵育约 2分钟(请注意实际孵育时间根据所用细胞系不同而有所差异); 5.在显微镜下观察细胞解离情况;如果解离程度未达 90%,可将孵育时间延长几分钟,每 30 秒 钟检查一次解离情况; 6.细胞解离程度大于等于 90%时,倾斜培养容器,使细胞上液体尽快流尽;加入所用解离剂两倍 体积的预热完全生长培养基;吹打细胞层表面数次,使培养基分散; 7.将细胞转移到15mL 无菌离心管中,以 200×g 的离心力离心 3-5 分钟 (请注意离心速度和时间依细胞种类不同而有所差异); 8.用最少体积的预热完全生长培养基重新悬浮细胞沉淀,将细胞悬液按照推荐比例稀释,并将适 量体积的细胞悬液转移到新的细胞培养容器中,把细胞放回培养箱(注:如果使用培养瓶,将其放 入培养箱前应将瓶盖旋松,以便进行充分的气体交换,除非您使用的是通气式培养瓶和透气性瓶 盖)。 悬浮细胞传代:将 T25 培养瓶中的悬液收集至离心管中 1000rpm 离心 5min,收集上清,加 1- 2ml 完全培养基重悬,按 1:2 比例进行比例传代分到新T25瓶中,补充5-181ml/瓶新的完全培养基 , 最后放入细胞培养箱中培养。
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data 期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16 作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1 DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞
动脉平滑肌细胞 (Arterial smooth muscle cells)
PriCells: 动 脉平滑肌 细 胞 (Arterial smooth muscle cells) 平滑肌分类 尽管体内各器官所含平滑肌在功能特性上判别很大,但一般可分为两大类:一类称为多单位平滑肌,其中所含各平滑肌细胞在活动时各自独立,类似骨骼肌细胞,如竖毛肌、虹膜肌、瞬膜肌(猫)、以及大血管平滑肌等,它们各细胞的活动受外来神经支配或受扩散 到各细胞的激素的影响;另一类称为单位平滑肌,类似心肌组织,其中各细胞通过细胞间的电耦联
实验步骤(一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。(二)、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。(三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15 min。(四)、将经抗生素浸泡过的肠段移入含Hepes Ringer缓冲液的塑料培养板中(培养板预先铺上705胶),在体视显微镜下沿肠系膜对侧纵行切开肠段,皮内针固定好四角,仔细地刮除粘膜层,翻转至外侧,小心地撕去肠系膜,再仔细地刮去浆膜
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