- ￥880
- 上海富雨生物
- FY-25JY136
- 进口/国产
- 2026年02月08日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货库存
- 供应商：
上海富雨生物
- 规格：
1×10^6cells/T25
酵母（Yeast）交替氧化酶（AOX）ELISA检测试剂盒
样品收集、处理及保存方法
1. 样本不能含叠 氮钠（NaN3），因为叠 氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。
3. 酵母萃取液或其它相关样本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测。
4. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 活性为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际活性。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成
|
名称 |
96孔配置 |
48孔配置 |
备注 |
|
微孔酶标板 |
12孔×8条 |
12孔×4条 |
无 |
|
标准品 |
0.3mL*6管 |
0.3mL*6管 |
无 |
|
样本稀释液 |
6mL |
3mL |
无 |
|
检测抗体-HRP |
10mL |
5mL |
无 |
|
20×洗涤缓冲液 |
25mL |
15mL |
按说明书进行稀释 |
|
底物A |
6mL |
3mL |
无 |
|
底物B |
6mL |
3mL |
无 |
|
终止液 |
6mL |
3mL |
无 |
|
封板膜 |
2张 |
2张 |
无 |
|
说明书 |
1份 |
1份 |
无 |
|
自封袋 |
1个 |
1个 |
无 |
注：标准品（S0-S5）活性依次为：0、12.5、25、50、100、200 U/L
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single－cell transcriptome sequencing data 期刊：MODERN ONCOLOGY，Aug．2023，VOL. 31，No. 16 作者：HU Wu1，WEN Yiqiao2，QIN Jialan1，ZHAO Ying3，ZHANG Tianbiao1 DOI：10．3969 /j．issn．1672－4992．2023．16．003
典型的巴斯德毕赤酵母表达载体载体包含醇氧化酶-1(AOX1)基因的启动子和转录终止子(5'AOX1和3'AOX1)，它们被多克隆位点(MCS)分开，外源基因可以在此插入。此载体还包含组氨醇脱氢酶基因(HIS4)选择标记及3'AOX1区。当整合型载体转化受体时，它的5'AOX1和3'AOX1能与染色体上的同源基因重组 ，从而使整个载体连同外源基因插入到受体染色体上，外源基因在5'AOX1启动子控制下表达。毕赤酵母本身不分泌内源蛋白，而外源蛋白的分泌需要具有引导分泌的信号序列。而由89个氨基酸组成
德毕赤酵母中存在着一种称为微体的细胞器 ,其中大量合成过氧化物酶,因此也称为过氧化物酶体。合成的蛋白质贮存于微体中,可免受蛋白酶的降解,且不对细胞产生毒害。 1.2 载体 巴斯德毕赤酵母的载体是整合型载体。常见的表达载体有pPIC3、pPIC9、pHIL-D1、pA0804、pA0815、pPSC3K等。图1为一个典型的巴斯德毕赤酵母表达载体。该载体包含醇氧化酶—1(AOX1)基因的启动子和转录终止子(5'AOX1和3'AOX1),它们被多克隆位点(MCS
P.Pastoris表达载体及其元件由于甲醇营养型酵母菌体内无天然质粒，所以携带外源基因的重组体必须整合于染色体中才能实现外源基因的表达。整合表达的优点在于保持外源基因稳定性并可产生多拷贝基因。典型的毕赤氏酵母表达载体含有醇氧化酶基因的调控序列，主要的结构包括：5’AOX1启动子片段、多克隆位点(MCS)、转录终止和polyA形成基因序列(TT)、筛选标记(His4或 Zeocin)、3’AOX1基因片段，作为一个能在大肠杆菌中繁殖扩增的穿梭质粒，它还有部分pBR322质粒或COLE1序列
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