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2122800
2122800哈希HACH 样品试管 10ml 25 x 54 mm
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文献和实验/冲洗缓冲液 (10 mM Imidazole, 0.3M NaCl, 0.05M sodium phosphate (pH8.0)) 100 ml His 洗脱缓冲液 (0.25M Imidazole, 0.3M NaCl, 0.05M sodium phosphate (pH8.0)) 产品特点: ● 用于纯化 6XHis 标签蛋白 ● 高载量,大于 50 mg/ml ● 配基密度,每毫升树脂结合 20-40μmoles 镍离子 ●
。加入甘氨酸可以消除甲醛使交联反应终止。1.1.准备两个长满细胞的150cm2的细胞培养皿(1*107-5*107 个细胞/皿)。将甲醛直接滴入PBS洗过的细胞培养皿中,使其终浓度为0.75%,然后在室温缓慢旋转10分钟,使蛋白和DNA发生交联。1.2 加入甘氨酸使其终浓度为125mM,在室温晃动孵育5分钟。1.3 使用10ml预冷PBS清洗细胞2次1.4 使用细胞刮将细胞收获放入 5ml 预冷PBS中,并转入50ml的管子。1.5.在皿里加入3mlPBS,将剩余的细胞转移到50ml管子里1000g
CTAB 缓冲液冲洗研钵,将冲洗液加到管中。 (3)将试管在60℃下放置30~60 分钟,然后轻轻振荡,使之充分混合后降至室温。 (4)在试管中加入10ml 氯仿-异戊醇(24:1)萃取液(如颜色深可再进行一次),轻轻摇晃使其混合,在室温下1500r/min 离心5 分钟,使其分相。 (5)将上层的水相倒入-15ml 管中,加2/3 体积的冷异丙醇,轻轻混合以沉淀核酸。如果看不到核酸沉淀,可在-20℃下放置20 分钟或更长时间。 (6)室温下 800r/min 离心 3~5 分钟
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