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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
常温运输,避光保存,24个月有效。
- 库存:
现货
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
200ml
用途:又称样本密度分离液,由葡聚糖500和泛影酸钠等配制而成。用于分离人外周血淋巴细胞的无菌、低内毒素水平的密度梯度分离液。其分离原理是根据血细胞的密度差异(红细胞和粒细胞密度为 1.090 g/mL 左右;淋巴细胞和单核细胞密度为 1.075~1.090g/mL;血小板为 1.030~1.035 g/mL),通过离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分布,从而将淋巴细胞从人外周血或脐带血中分离出来。
注意事项:无菌溶液,密度为1.077±0.003g/ml,渗透压 290~350 mOsm/kg H2O,经0.1μm 滤膜过滤除菌。分离液使用时应始终保持室温(18℃~25℃),如室内温度较低,可将分离液预热。4℃或者是温度较低的条件下离心,可能会导致白膜层不清晰。
储运及效期(运输/储存/有效期):常温运输,避光保存,24个月有效。
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文献和实验Ficoll:一种已灭菌的,特定密度的密度梯度离心介质。被广泛用作从外周血、骨髓及脐带血中分离高活性的单个核细胞。 Ficoll-Paque溶液包含: Ficoll PM400:由高分子量蔗糖(Mr 400K)聚合物与表氯醇聚合合成(凝集红细胞) 泛影酸钠:使溶液在低粘度下具有高密度 EDTA二钠钙 Ficoll的保存:开盖前保存在4℃~30℃(避光),开盖后保存在 4℃~8℃(避光) Ficoll 产品细分如下: 使用Ficoll (1.077g/ml) 分离人外周血
g/mL,未超出正常生理性渗透压,也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大,离心后沉于管底;淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重,离心后漂浮于分层液的液面上,也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞,就可从外周血中分离到单个核细胞。 人 PBMC 中不同细胞类型的比例 PBMC 中大部分都是淋巴细胞,包括 B 细胞和 T 细胞,其中 CD3 T 细胞又占了淋巴细胞中绝大部分 (45 - 70%)。这些 T 细胞都处于初始(naive)状态,即已经成熟了但没有受到抗原
实验步骤:1、EB病毒液的制备复苏B95.8细胞株,使用培养基为10% FCS RPMI-1640逐步添加培养基至细胞长至对数生长期细胞计数,调节细胞数量为1×10^6个/ml在CO2培养箱中继续续培养10天,中间不换液至第10天收集培养上清,1800rpm,4℃离心15分钟0.22μm滤器过滤,1ml/支分装,冻存于液氮备用2、病人外周血液的采集、分离使用枸橼酸钠抗凝管采集恢复期病人外周血10ml,尽量在24h内进行分离平衡盐(BSS, balanced salt solution)溶液
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