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文献和实验1 主题内容与适用范围本文规定了食品中沙门氏菌的检验方法。本文适用于航空食品的检验。2 设备和材料吸管(1ml、10ml)、恒温培养箱(36±1℃、42℃)、冰箱、均质器、振荡器、平皿、稀释瓶、天平、显微镜、接种棒等3 培养基和试剂缓冲蛋白胨水(BP)、氯化镁孔雀绿增菌液、四硫酸钠煌绿(TTB)增菌液、亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液、亚硫酸铋琼脂(BS)、DHL琼脂、HE琼脂、WS琼脂、SS琼脂、三糖铁琼脂、蛋白胨水、靛基质试剂、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基、氨基酸脱羧酶试验
术刀片在待回收 DNA 片段前方挖一槽,然后用同样浓度的低溶点琼脂糖将槽填平,继续电泳至待回收 DNA 片段进入低熔点琼脂糖中;(2)在 UV 灯下,用手术刀片将含 DNA 的低熔点琼脂糖凝胶切下,37 ℃ 水浴 10 min 至凝胶融化为止;(3)加入等体积的 TE 饱和酚/氯仿 (1:1) 抽提,12000 rpm 离心 5 min;(4)将上层水相移至另一离心管中,用 2.5 倍体积乙醇和 0.1 倍体积 3 mol/L NaAc(pH5.2) 沉出、75% 乙醇漂洗一次,晾干备用。3. DNA 回收
反应(淀粉被分解)为琼脂培养基呈深蓝色、菌落或培养物周围出现无色透明环、或肉汤颜色无变化。阴性反应则无透明环或肉汤呈深蓝色。 淀粉水解系逐步进行的过程,因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间,培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。培养基pH必须为中性或微酸性,以pH7.2最适。淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱,因而以临用时制备为妥。 3、V-P试验 某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸缩合,脱羧成乙酰甲基甲醇,后者在强碱环境下,被空气中氧氧化为二乙酰,二乙酰与蛋白胨中的胍
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