大肠杆菌噬菌体MS2液体培养基

噬菌体的分离与纯化

一、目的要求 1. 学习分离、纯化噬菌体的基本原理和方法。 2. 观察噬菌斑。 二、基本原理 因为噬菌体是专性寄生物，所以自然界中凡有细菌分布的地方，均可发现其特异的噬菌体的存在，亦即噬菌体是伴随着宿主细菌的分布而分布的，例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌，故也能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体；乳牛场有较多的乳酸杆菌，也容易分离到乳酸杆菌噬菌体等。 由于噬菌体侵入细菌细胞后进行复制而导致细胞裂解，噬菌体即从中释放出来，所以 (a)在液体培养基内可使

大肠杆菌杂交

+，没有F因子为F-。F因子是一个小的DNA环状分子，分子量约4.5×106道尔顿。带有F因子的细胞，表面有一种称为性菌毛的毛状突起，长约1至20μ。性菌毛上有雄性专一噬菌体（MS2、k17、f2、Qβ等）的吸附位点，又和细胞的接合有关。F因子在细胞中能以二种状态存在；游离状态和整合到寄主染色体 的一定位置。以致带有F因子的大肠杆菌可分为二类：F+和Hfr菌株。经吖啶橙处理F+变为F-，而Hfr性质不变，说明F因子在F+菌株中呈游离状态，而在Hfr菌株中则整合到寄主染色体的一定位置（图12

噬菌体：首尾相接，总长可达两亿光年

首先要了解什么是噬菌体 噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或者螺旋体等微生物病毒的总称，在电子显微镜下有三种形态：蝌蚪形、丝形、微球形，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。跟别的病毒一样，噬菌体只是一团由蛋白质外壳包裹的遗传物质，大部分噬菌体还长有“尾巴”，用来将遗传物质注入宿主体内。 更狠的是，噬菌体颗粒感染一个细菌细胞后可迅速生成几百个子代噬菌体颗粒，每个子代颗粒又可感染细菌细胞，再生成几百个子代噬菌体颗粒。当把细菌涂布在培养基上长成一层菌苔时，一个噬菌体只要感染其中一个细菌