刘氏染色液-刘B溶液(4*B液)

Western 实验步骤

BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线：用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线，具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品，每个浓度（0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA，其余用 PBS 补齐至 20 μL）梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度：10 倍稀释法：取 18 μLPBS+2 μL 样品上清（经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min

免疫金银染色（immuno gold silver staining，IGSS）

IGSS的主要 试剂 为银染液。以往一般用硝酸银染液，但其对光的稳定性较差；改用乙酸银溶液后稳定性加强，配方如下： 　　A液：0.22％乙酸银溶液（乙酸银110mg溶于去离子水50ml中）。 　　B液：50％阿拉伯树胶溶液（阿拉伯树胶50g溶于去离子水100ml中，每天振摇3次，5天后过滤使用）。 　　C液：1％对苯二酚溶液（对苯二酚500mg溶于0.55mol/LpH3.8的柠檬酸盐缓冲液50ml中）。 　　D液：在C液中加入B液

叶绿体色素的定量测定

【原理】根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，利用分光光度计在某一特定波长下测定其光密度，即可用公式计算出提取液中各色素的含量。根据朗伯—比尔定律，某有色溶液的光密度D与其中溶质浓度C和液层厚度L成正比，即：D=kCL式中：k为比例常数。当溶液浓度以百分浓度为单位，液层厚度为1cm时，k为该物质的比吸收系数。各种有色物质溶液在不同波长下的比吸收系数可通过测定已知浓度的纯物质在不同波长下的光密度而求得。如果溶液中有数种吸光物质，则此混合液在某一波长下的总光密度等于各组分在相应波长下光密度的总和