柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(1mol/L,pH6.0)非无菌

DNA探针标记常用试剂的配制

，用醋酸调pH至6.5，加水至250ml，高压灭菌，或0.45μm膜过滤，室温保存。 （11）10% SDS：10g SDS（十二烷基硫酸钠）溶于50ml水中，加水至100ml，分装后室温保存。　　（12）20×SSC：取NaCl 175.3g；柠檬酸钠88.2g；加水至1000ml，用10mol/l NaOH调pH至7.0；高压灭菌，室温保存。　　（13）无菌水：100ml去离子水或双蒸水，分装，高压灭菌，室温保存，开瓶后仅限一周使用。　　（14）10×激酶缓冲液：500mmol/L

关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结

低pH凝胶系统，并使用以下缓冲液体系：分离胶：0.06M/l KOH，0.376M/l Ac，pH4.3（7.7% T，2.67% C）堆积胶：0.06M/l KOH，0.063M/l Ac，pH6.8（3.125% T，25% C）电泳缓冲液：0.14M/l 2-丙氨酸(β-丙氨酸)，0.35M/l Ac，pH4.5用于低PH凝胶时将正负电极倒置，于低PH凝胶系统中用甲基绿（0.002%）为示踪剂。酶活一般可以保留，除非酶蛋白特别热敏和不稳定。Native- PAGE电泳时1，可设两个样品孔

核酸抽提：mRNA的分离

mol/L柠檬酸钠代替Tris.Cl 然后用DEPC处理柠檬钠－NaCL-EDTA和SDS的混合溶液。 4. 用灭菌水溶解RNA，于65℃温育5分钟后使迅速冷却至室温，加等体积的2x层析柱加样缓冲液，上样，立即用灭菌的试管收集洗液。 当所的RNA溶液均进入柱床后，加1倍体积的1x层析柱加样 ，继续收集洗出液。加热RNA可以破坏可能涉及poly(A)尾的二级结构。 5. 当全部溶液流出后，将收集液置于65℃温育5分钟，重新上样，并收集流出液。