Peroxidase(POD)辣根过氧化物酶 HRP Roc

辣根过氧化物酶 horseradish peroxidase

缩写为FRP．为过氧化物酶之一种，含于辣根（ horseradish）中。 1941年 F· Thcorell曾提取其结晶。将之吸入细胞或注入之后，以 3， 3′ -二氨基联苯（ 3， 3′－ diaminobenzidine）为底物进行作用时，在光学或电子显微镜下可以看到一定的标记。最早为 W． Straus（ 1959）曾用以鉴别吞噬小体 Ph-agosome． K． Kristensson和 G． Olsson，（ 1974）在对利用轴突内逆行运输的神经元、轴突分支的着染，并而用于

HRP底物的贮存和实验方法

性的保护提高至90%。 (一)　酶制剂及其底物 凡无毒性又能呈现有色化学反应的酶，原则上均可作为标记用。但作为标记抗体用的酶应满足下列要求：(1)来源方便，易于纯化;(2)比活性高，性质稳定;(3)酶活性和量能用简单方法测定。目前在免疫 酶技术中常用的酶为辣根过氧化物酶(HRP)和硷性磷酸酶(AP)，其次还有葡萄糖氧化酶，β-半乳糖苷酶、溶菌酶和苹果酸脱氢酶等。 由于辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)比活性高，稳定，分子

亲和素―生物素―过氧化物酶复合物法

pH值时，酶分子应稳定；(5)在酶标过程中，酶连接在抗体上，不影响两者的活性。符合上述要求的最为常用的酶是辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，AP)。HRP存在于植物辣根中，由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合成一种糖蛋白．分子量约40kD，稳定性好，其底物为过氧化物和供氢体，前者常用过氧化氢和过氧化氢尿素，后者常用二氨基联苯胺(diaminobenzidine，DAB)。DAB是无色还原型染料，能被氧化生成不溶