十六碳酰胺 95.0%(GC)

GC含量高的PCR小结

.（clontech), 效果好，就是贵了点。我用的退火温度为60度可见模糊片段，但58度就只有引物二聚体了，你用高温变性，向95度，5min,后加入taq酶，其余度循环中间用95度，15s，如果TM值高过60，可以考虑用65－62度，增加循环数。changle可以用双温法试试，比如35个循环，总变性之后，前五个循环双温即没有延伸，后三十个循环三温，具体温度根据引物Tm值定。我试过效果不错。mcli如果基因的5’端含有丰富的GC碱基，设计的PCR引物Tm值很高，用普通PCR很难理想地扩增出此基因。用热启动（hot

用GC－MS法分析柿树叶中的脂肪酸

日报载：柿叶中含有机酸、挥发油、生物碱、还原糖、多糖、鞣质、酚类和香脂精等多种有效成分，柿叶中还富含治疗癌症的“黄酮甙类”化合物。作者意欲系统分析柿叶中各类化合物的结构和含量，现已用GC－MS方法分析了柿叶中的挥发成分及含量,研究了柿叶中“黄酮甙类”化合物的提取和精制。本文仅介绍柿树叶中脂肪酸组成的分析结果。样品测试过程使用FFAP极性弹性石英毛细管柱，GC－MS法测试[3，4],计算机数据处理方法，共分离出21个组分，鉴定出19种脂肪酸，其中以肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、十六碳三烯酸、亚油酸、亚麻

dxy review -- 模板高GC含量问题

的GC碱基，设计的PCR引物Tm值很高，用普通PCR很难理想地扩增出此基因。用热启动（hot start）和降落-PCR，能取得了较好效果。在PCR开始时加入Qiagen公司的Hotstar Taq DNA聚合酶，并延长起始变性时间如95℃变性15 min，能使模板DNA完全变性，以便提供最大数量的引物配对位点，可避免引物二聚体和非特异性配对。PCR反应过程中，首先在高于引物Tm值的72℃左右扩增几个循环，然后把退火温度逐渐降到两引物的Tm值附近，在随后的循环中，对退火温度进行梯度实验。这样能保证