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1g
产品货号:XF-J3127
产品规格:1g
产品包装:瓶
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文献和实验Materials2 ml size Sarstedt screw cap tubesBIO-RAD Disposable Chromatography Column (BIO-RAD cat. #732-6008)Oligo dT celluloseRNase-free water5.0 M NaCl0.5 M EDTA1.0 M Tris, pH 7.410% SDS70% EtOHBefore starting protocol1. Measure out 75 mg of oligo
CHROMATIN IMMUNOPRECIPITATION (CHIP) PROTOCOL FOR YEAST
with 0.5 mM PMSF. Spin down @ 5K, 5 minutes, 4℃. Drain. Gently resuspend cell pellet in 5 mL cold Triton X/HEPES with 0.5 mM PMSF, 0.8 ug/mL pepstatin A, and 0.6 ug/mL leupeptin. Spin down @ 7 K, 7 minutes, 4℃. Drain. Gently resuspend cell pellet
糖,建议进行 Pre-clear;如果使用磁珠,此步可忽略 抗 X 抗体的轻链(25 kD)和重链(50 kD) 更侧重于如何在实验上进行优化(见下文) *注意:总蛋白上样量过多也会造成 非特异性结合,建议上样量为 500 ug-1 mg。上样之前一定要先用 BCA 定个量!定个量!定个量! pre-clear:上样前先用裂解液过一遍柱子,减少基质本身对蛋白的吸附 Output:在某些 co-IP 实验中,实验人员会把IP后的上清分别进行诱饵蛋白 X 和靶蛋白 Y 的 WB 检测
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