活体细胞溶酶体膜通透性（LMP）/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色

在荧光显微镜下观察拍照。培养板存放在4度冰箱，避光，荧光强度在一月内可以没有明显减弱。 此外，还要建议你。采用荧光染色的方法, 可以确证细胞存活与凋亡的状态。这种荧光染色法，根据细胞核结构、细胞膜完整性不同，可以被吖啶橙（AO）和溴乙啶（EB）混合荧光染料染成不同颜色，从而区别细胞是存活还是发生凋亡。AO能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA ，使细胞发出绿色荧光，而EB仅能通过胞膜受损的细胞，嵌入DNA使之发出橙红色荧光。将两种染料混合使用时，正常活细胞的核染色质着绿色，形态结构正常；早期

细胞自噬系统介绍

、内质网、高尔基体关系密切，为了区别，常用到一些示踪蛋白在荧光显微镜下来共定位：   Lamp-2：溶酶体膜蛋白，可用于监测自噬体与溶酶体融合。 LysoTrackerTM 探针：有红或蓝色可选，显示所有酸性液泡。 pDsRed2-mito：载体，转染后表达一个融合蛋白（红色荧光蛋白+线粒体基质定位信号），可用来检测线粒体被自噬掉的程度（Mitophagy）。 MitoTraker探针：特异性显示活的线粒体，荧光在经过固定后还能保留。 Hsp60：定位

常用细胞凋亡检测方法（图）

(Hoechst 33258), DAPI。三种种染料与DNA的结合是非嵌入式的，主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。Hoechst是与DNA特异结合的活性染料，储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用时用PBS稀释，终浓度为10 ug/ml。DAPI为半通透性，用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用终浓度一般为10 ug/ml。结果评判：细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期：Ⅰ期的细胞核呈波纹状（rippled）或呈折缝样（creased