Hoechst 33342染色液(即用型)10ug/mL

Isolation of Resident Cardiac Progenitor Cells by Hoechst 33342 Staining

of stem cells to efficiently efflux vital dyes such as Hoechst 33342. During fluoresence activated cell sorting (FACS) such Hoechst-extruding cells appear to the side of Hoechst-dye retaining cells and have thus been termed side population (SP) cells

Hoechst染色的讨论

细胞是用95％的酒精固定20分钟，PBS洗两遍，hochest33258(100ug/ml)染10分钟，然后PI（100ug/ml）染20分钟，50％甘油封片。至于荧光显微镜的激发波长，我还不是很清楚， midas: 哈哈，反了！应该先染色，后固定！hochest33258对活细胞的损伤稍大一些，最好用hochest33342。终浓度用10ug/ml就可以了！激发波长：hochest用紫外激发；PI用绿光激发！ linger:您曾经发过一张帖子写到“hoechsts33258，hoechst33342

Hoechst 33342/PI双染色法

1．悬浮生长的细胞在培养状态下加入Heochst 33342，终浓度为1μg/ml；帖壁生长的细胞用含有0.02％EDTA的0.25％胰蛋白酶消化成单细胞悬液，离心，弃上清，用1ml全培养液重悬细胞，加入Heochst 33342，终浓度为1μg/ml，37℃孵育7～10min。 2．4℃ 500～1000r/min离心弃去染液。 3．加入1.0ml PI染液，4℃避光染色15min。 4．400目的筛网过滤1次。 5．流式细胞仪分析。